病毒对几种理化因素的抗性测定

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一、热灭活试验

有些病毒对热敏感，在50℃经30min被灭活，但其敏感性可受营养液中的某些物质的浓度影响，如L-胱氨酸和L-半胱氨酸。因此试验中条件的标准化很重要。

1．将2ml病毒悬液加于试管中，置50℃水浴中30min。

2．同样的病毒悬液在4℃30min作为对照。

3．滴定毒价，比较差异(同氯仿)。

二、阳离子稳定试验

高浓度二价阳离子如MgCl₂能稳定某些病毒如肠道病毒和呼肠孤病毒等，使其在50℃经60min不被灭活。另外一些病毒如腺病毒、疱疹病毒和痘病毒等则反增加对热的敏感性。

1．将病毒悬液用1．0mol／L MgCl₂作10倍稀释。对照管用蒸馏水作同样稀释(对照)。

2．在50℃水浴1h。

3．滴定毒价，比较两组的差别，判定标准同氯仿试验。

三、酸敏感试验

在pH3溶液中经30min能降低某些病毒的感染力(如口蹄疫病毒)，而对另一些病毒没有作用(如猪水疱病病毒等肠道病毒)。

1．将病毒1份加pH3的Hanks氏液9份，在25℃放置2h。另用pH7．2的Hanks氏液与病毒悬液作同样处理(对照)。

2．试验组用0．1mol／L NaOH调节pH到7．2。

3．滴定毒价，比较两组差别，判定标准与氯仿试验同。

四、胰蛋白酶敏感试验

某些病毒如肠道病毒、冠状病毒和轮状病毒等对胰蛋白酶有较强的抵抗力，而另一些病毒如疱疹病毒和痘病毒等对此敏感。

1．将胰蛋白酶用PBS(pH7．4)配成1%溶液，过滤灭菌。

2．病毒悬液用3000r／min离心30min，取上清加等量胰酶溶液充分混合。另取病毒悬液加等量PBS混合，与试验组同样处理作为对照。

3．37℃放置1h，加入4倍量犊牛血清，以终止胰酶作用。

4．滴定毒价，比较两组差异，判定标准与氯仿试验同。