(1)苹果和土壤中残留量检测方法(方法一)

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山东省农业科学院植物保护研究所 于建垒 宋国春

苹果用丙酮提取，二氯甲烷萃取，弗罗里硅土／活性炭柱层析净化；土壤用乙酸乙酯／石油醚混合液提取。气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

旋转蒸发器

超声波清洗器

小型真空泵

层析柱 10mm×250mm

2．主要试剂

丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、正己烷、氯化钠、无水硫酸钠、弗罗里硅土、活性炭

异菌脲标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

称25g样本，于250mL具塞三角瓶中，加入25g无水硫酸钠和100mL乙酸乙酯／石油醚(1∶4，V／V)，浸泡过夜，超声波提取15min，经无水硫酸钠过滤。滤渣用100mL乙酸乙酯／石油醚(1∶4，V／V)超声波提取15min，过滤，合并滤液于250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(65℃)浓缩至干，用石油醚定容至25mL，待测。

3．1．2 苹果

称50g切碎的样本，加50mL蒸馏水，匀浆。称取20g匀浆样本(相当于10g苹果样本)于250mL具塞三角瓶中，加入60mL丙酮，浸泡过夜，超声波提取15min，过滤。滤渣用30mL×3丙酮超声波提取，过滤。合并滤液于250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(58℃)除去丙酮。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

苹果的残余水溶液用20mL二氯甲烷转移到250mL分液漏斗中，加入30mL5%氯化钠溶液，用25mL×3二氯甲烷萃取，每次2min。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至3～5mL，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱内依次填装2cm厚无水硫酸钠、6g弗罗里硅土／活性炭(95∶5，W／W)和2cm厚无水硫酸钠，用40mL二氯甲烷预淋。将上述蒸残液转入柱中，用80mL乙酸乙酯／二氯甲烷(95∶5，V／V)洗脱。收集洗脱液，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至干，用丙酮定容至10mL，经0．45μm微孔滤膜过滤，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 0．53mmi．d．×30m毛细管石英柱，内涂弱极性混合固定液

检测温度 柱温260℃；进样口330℃；检测器330℃

载气 高纯氮，45mL／min

保留时间 5．2min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－11g。

最低检测浓度 0．01mg／kg。

回收率 苹果和土壤中添加异菌脲0．1～10．0mg／kg时，平均回收率分别为95．6%～105．4%和98．2%～106．7%，见表2-18-1。

相对标准偏差 0．9%～4．4%，见表2-18-1。

表2-18-1 苹果和土壤中异菌脲添加回收率及相对标准偏差实验结果