(1)油菜植株和土壤中残留量检测方法

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国家环境保护总局南京环境科学研究所 单正军 石利利 朱忠林 俞飞 金怡 蔡道基

样本用丙酮提取，中性氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定喹禾糖酯；经甲酯化反应，气相色谱法(ECD)测定代谢物喹禾灵酸。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

高速离心机

恒温振荡器

旋转蒸发器

2．主要试剂

丙酮(重蒸)、石油醚(重蒸)、乙醚(重蒸)、无水硫酸钠

中性氧化铝 100～200目，140℃处理8h，加5%水减活，密封贮存于干燥器中备用

喹禾糖酯标准品、喹禾灵酸标准品

3．检测步骤

3．1 提取与液-液分配

称20g粉碎好的植株(土壤50g)，于250mL磨口三角瓶中，加100mL丙酮浸泡过夜，在恒温振荡器中振荡提取1h。将提取液转入250mL的离心管中，离心分离，过滤。在滤液中加50mL2%硫酸钠水溶液，用25mL×2石油醚萃取两次。合并石油醚相浓缩至5mL，用于喹禾糖酯的净化与测定；水相部分用于喹禾灵酸的净化与测定。

3．2 净化与酯化

3．2．1 喹禾糖酯

层析柱内依次装入2cm厚无水硫酸钠、8g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，用适量石油醚预淋并饱和层析柱。将上述有机相浓缩液转移至柱内，用25mL石油醚淋洗，弃去。用25mL乙酸乙酯／石油醚(10∶1，V／V)洗脱。收集洗脱液，浓缩定容后，待液相色谱测定。

3．2．2 喹禾灵酸

将3．2．1的水相用25mL×2二氯甲烷萃取，合并萃取液，浓缩至干。加甲醇、浓硫酸各2mL，在50℃水浴中甲酯化10min，使反应完全。冷却后加50mL2%硫酸钠溶液，用25mL石油醚萃取两次。合并石油醚相，用旋转蒸发器浓缩至近干。用石油醚定容至一定体积，待气相色谱测定。

3．3 色谱法测定

3．3．1 喹禾糖酯液相色谱法测定

检测器 UV

波长 235nm

色谱柱 symmatry^RC₁₈柱，4．6mm×250mm

流动相 甲醇／水(70∶30，V／V)

流速 1．0mL／min

进样量 20μL

保留时间 18．30min

3．3．2 喹禾灵酸气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 HP-1，10m×0．53×2．65μm

检测温度 柱温155℃；进样口200℃；检测器250℃

载气 高纯氮，30mL／min

进样量 1μL

保留时间 5．90min

4．结果计算

外标-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 喹禾糖酯1×10^－11g，喹禾灵酸2×10^－12g。

最低检测浓度 油菜植株和土壤中的喹禾糖酯和喹禾灵酸均为0．01mg／kg。

回收率 油菜植株中添加喹禾糖酯和喹禾灵酸0．10～2．00mg／kg时，平均回收率分别为87．7%～99．3%和84．7%～89．5%；土壤中添加喹禾糖酯和喹禾灵酸0．05～0．50mg／kg时，平均回收率分别为97．0%～101%和78．7%～84．6%。见表3-35-1。

相对标准偏差 1．6%～11．1%，见表3-35-1。

表3-35-1 油菜植株和土壤中喹禾糖酯、喹禾灵酸添加回收率及相对标准偏差实验结果