薄层斑点面积法
薄层斑点面积法 薄层色谱中,色谱斑的面积大小与样品量之间存在一定的关系,所以可测定色斑面积大小以求得样品含量。 但由于各个作者所用的层析条件和所研究的化合物不同,提出几种不同的关系式: ❶ 样品量的对数与色斑面积成线性关系,如以A表示色斑面积,W表示样品量。则  ❷ 样品量的对数与色斑面积平方根或线性关系  ❸ 样品量的对数与色斑面积平方根的对数成线性关系  ❹ 样品量与色斑面积成线性关系  ❺ 样品量与色斑面积的平方根成线性关系  至于哪一种线性关系适用于被测化合物,要通过试验来决定。目前,样品的对数与色斑面积的平方根成线性关系,使用范围较普遍。 例如穿心莲内酯加成物薄层定量:用穿心莲A104标准品和穿心莲样品点于硅胶板上,用氯仿-甲醇-正丁醇(2∶2∶1)为展开剂展开,干后,用Kedde试剂(3,5二硝基苯甲酸甲醇液和氢氧化钾甲醇液等量混合)显色。 用透明纸覆盖于薄层上,绘出色斑的大小,再将此纸覆盖在毫米座标纸上,读出面积大小。依据物质面积平方根( )与物质重量对数(logW)成正比,可用两种方法求出logW值。 ❶ 标准曲线法  式中W为样品量,Ws为标准品量,A为样品面积,As为标准品面积,Ad为样品稀释液的面积,d为稀释度。 |