花生仁、壳、植株和土壤中残留量检测方法

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中国农业科学院烟草研究所 曹爱华 徐光军 冯涛 刘保安

花生仁、植株用石油醚提取，花生壳、土壤用酸性甲醇提取，石油醚萃取。弗罗里硅土与活性炭混合柱层析净化，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

超声波提取器

组织捣碎机

旋转蒸发器

恒温水浴锅(±2℃)

层析柱 Φ15mm×300mm

2．主要试剂

石油醚(重蒸)、甲醇(重蒸)、苯(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)、正己烷(重蒸)、乙腈(重蒸)、无水硫酸钠、活性炭

酸性甲醇 20mL浓盐酸+200mL去离子水+780mL甲醇，混匀

弗罗里硅土 80～100目，600℃烘4h，加5%水减活

百菌清标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

称取40g，加100mL酸性甲醇，浸泡过夜，超声波振荡提取30min，过滤。量取50mL滤液(相当20g样本)，转入250mL分液漏斗中，加60mL0．1mol／L盐酸，用80mL、70mL、60mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水，浓缩至近干，用甲苯定容待测。

3．1．2 花生仁

称取50g磨碎的花生仁，加200mL石油醚，捣碎1min，过滤，量取80mL(相当20g样本)，浓缩后待净化。

3．1．3 花生秧

取50g鲜秧(干秧20g)，加200mL石油醚，浸泡过夜，超声波振荡提取30min。加20g无水硫酸钠过滤(干秧不加)，量取100mL滤液(相当鲜秧25g、干秧10g)，浓缩后待净化。

3．1．4 花生壳

取20g样本，加240mL酸性甲醇，浸泡过夜，超声波振荡提取30min，过滤。量取120mL(相当10g样本)，溶液转入250mL分液漏斗中，加60mL0．1mol／L盐酸，用80mL、70mL、60mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水，浓缩至3mL待净化。

3．2 净化

在层析柱内依次填入3cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土与0．25g活性炭的混合填料和3cm无水硫酸钠，用20mL二氯甲烷预淋。将样本浓缩液转入柱中，用100mL正己烷／乙腈／二氯甲烷(97∶3∶100，V／V／V)混合液淋洗，收集全部洗脱液，浓缩至近干，用甲苯定容至10mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 Φ3mm×2m玻璃柱，3%OV-17／ChromsdrbWAWDMCS

检测温度 柱温175℃；进样口240℃；检测器230℃

载气 高纯氮，50mL／min

进样量 1μL

保留时间 2．72min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－12g。

最低检测浓度 花生仁、花生壳和花生秧均为0．2mg／kg，土壤0．1mg／kg。

回收率 花生仁、花生秧、花生壳、土壤中添加百菌清0．05～1．00mg／kg时，平均回收率分别为95．4%～99．6%、92．8%～95．5%、93．6%～96．3%和90．5%～97．3%，见表2-4-2。

相对标准偏差 2．5%～8．8%，见表2-4-2。

表2-4-2 花生仁、壳、秧和土壤中百菌清添加回收率及相对标准偏差实验结果