芝麻籽粒、植株和土壤中残留量检测方法(方法二)

---

浙江省农药检定管理所 汤富彬 楼正云

样本用盐酸溶液和甲醇／丙酮混合溶剂提取，经液-液分配和弗罗里硅土柱层析净化，液相色谱(DAD)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 二极管阵列检测器(DAD)

国际型振荡器

真空旋转蒸发器

高速均质器

层析柱 10mmi．d．×200mm

2．主要试剂

甲醇(HPLC级)、二氯甲烷、甲醇、丙酮、乙酸、盐酸、氯化钠

无水硫酸钠 使用前经600℃灼烧

弗罗里硅土 100～120目，使用前经600℃处理，加5%水减活

精喹禾灵标准品、精喹禾灵丙酸(代谢物)标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取10．0g芝麻样本用研钵磨碎(或切碎的植株样本10g、风干土壤样本10g)，置于三角瓶中，加入20mL1．5mol／L盐酸溶液，静置10min后，加入40mL甲醇／丙酮(3∶1，V／V)。植株样本高速匀浆2min；土壤样本振荡提取1h；芝麻样本浸泡过夜后振荡提取1h。用布氏漏斗抽滤。用10mL甲醇／丙酮(3∶1，V／V)分3次洗残渣，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将提取液转移至500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠溶液，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，减压浓缩至1～2mL，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱内，用15mL甲醇湿法装柱，依次装入2cm无水硫酸钠、2．0g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠。用2mL×2甲醇将上述浓缩液转移入净化柱内，并用50mL1%乙酸／甲醇(1∶99，V／V)洗脱。收集全部洗脱液，浓缩至近干(不得蒸干)。用甲醇定容至2．0mL，待测。

3．3 液相色谱测定

检测器 DAD

检测波长 234nm

色谱柱 Discovery C₁₈，250mm×4．6mm，5m

柱温 28℃

进样量 20μL

流动相 甲醇／0．2%磷酸溶液(27∶4，V／V)

流速 0．60mL／min

保留时间 精喹禾灵9．5min，精喹禾灵丙酸7．5min

4．结果计算

外标法(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 精喹禾灵1．5×10^－10g，精喹禾灵丙酸1．5×10^－10g。

最低检测浓度 精喹禾灵和精喹禾灵丙酸在籽粒中为0．020mg／kg，在植株中为0．015mg／kg，在土壤中为0．015mg／kg。

回收率 芝麻植株、芝麻籽粒和土壤中添加精喹禾灵1．0～5．0mg／kg，平均回收率分别为82．8%～97．8%、81．8%～87．8%和79．2%～96．6%；添加精喹禾灵丙酸0．1～5．0mg／kg，平均回收率分别为86．4%～104．4%、83．0%～99．5%和94．1%～101．9%。见表3-34-2。

相对标准偏差 1．1%～9．3%，见表3-34-2。

表3-34-2 土壤、芝麻植株、芝麻籽粒中精喹禾灵、精喹禾灵丙酸添加回收率及相对标准偏差实验结果