糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法(方法一)

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中国农业大学理学院 钱传范 韩丽君 刘丹

样本用丙酮提取，二氯甲烷萃取，硅胶柱层析净化，气相色谱法(FPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 火焰光度检测器(FPD)

空气浴振荡器

旋转蒸发器

植物粉碎机

稻谷检验脱壳机

层析柱 Φ15mm×300mm

2．主要试剂

二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚、氯化钠、无水硫酸钠

层析硅胶 60～80目

莎稗磷标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 田水

取100mL样本，过滤后置于500mL分液漏斗中，加入20g氯化钠，用50mL、30mL、30mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经装有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(35～40℃)浓缩至近干，吹干后用乙酸乙酯定容至1～2mL，待测。

3．1．2 糙米、土壤、稻苗、稻秆与稻壳

糙米、稻壳粉碎后过40目筛，取10g；稻苗、稻秆剪成约5mm的小段，取10g；土壤取50g(干重)。将样本置于500mL三角瓶中，加入100mL丙酮／2%氯化钠溶液(9∶1，V／V)，振荡提取1h，抽滤。用50mL提取液洗涤残渣，抽滤。合并滤液，用旋转蒸发器(35℃)蒸去部分丙酮。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将50mL左右浓缩液，移入分液漏斗中，加150mL2%氯化钠水溶液，用50mL、30mL、30mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经装有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(35～40℃)浓缩至近干，吹干后用乙酸乙酯定容至1～2mL，待测。糙米样本萃取液浓缩至5mL，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中，用石油醚／乙酸乙酯(1∶1，V／V)淋洗液依次装入2cm无水硫酸钠、5g硅胶、2cm无水硫酸钠，用30mL淋洗液预淋。将糙米浓缩液转移至柱顶，用50mL该淋洗液洗脱，收集此洗脱液于50mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至近干，吹干，用乙酸乙酯定容1～2mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 FPD

色谱柱 3mmi．d．×1m，3%OV-17／Gas Chromosorb Q(80～100目)

检测温度 柱温220℃；进样口240℃；检测器250℃

载气 高纯氮 1．25kg／cm²

燃烧气 空气0．85kg／cm²，氢气1kg／cm²

进样量 1μL

保留时间 7．2min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 5×10^－10g。

最低检测浓度 糙米、稻秆、稻苗、稻壳0．05mg／kg，水0．005mg／L，土壤0．01mg／kg。

回收率 糙米、稻壳、稻苗和稻秆中添加莎稗磷0．05～0．50mg／kg时，平均回收率为81．9%～96．1%；土壤中添加莎稗磷0．05～0．5mg／kg时，平均回收率为88．7%～96．1%；田水中添加莎稗磷0．02～0．5mg／kg时，平均回收率为98．6%～99．8%。见表3-5-1。

相对标准偏差 0．3%～6．6%，见表3-5-1。

表3-5-1 糙米、稻壳、稻苗、稻秆、土壤和田水中莎稗磷添加回收率及相对标准偏差实验结果