糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法

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云南省农业科学院植物保护研究所 张雪燕 何婕

样本用0．25mol／L的盐酸加热回流提取，石油醚液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法(NPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 氮磷检测器(NPD)

植物粉碎机

恒温水浴锅

振荡器

旋转蒸发器

大容量离心机

层析柱 Φ15mm×200mm

2．主要试剂

丙酮(重蒸)、石油醚(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、无水硫酸钠、氯化钠、盐酸、助滤剂545

弗罗里硅土60～100目，经650℃处理4h，3%水减活

异噁草酮标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 糙米、稻壳、植株

称取10g切碎的植株(糙米、稻壳和植株均粉碎过40目筛，各取5g)，置于500mL圆底烧瓶中，加入150mL0．25mol／L的盐酸溶液，回流提取1h。用20mL蒸馏水冲洗冷凝管，冷却至室温，在铺有1g助滤剂的布氏漏斗上抽滤。用100mL提取剂清洗滤渣和蒸馏瓶。

3．1．2 土壤

称取20g40目风干样本于250mL具塞三角瓶中，加10g无水硫酸钠、100mL丙酮／石油醚(1∶1，V／V)，浸泡过夜，振荡提取1h，过滤。滤渣再用100mL提取剂振荡提取1h。合并滤液，用旋转蒸发器浓缩至3～4mL，待柱层析净化。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 田水

取100mL过滤后水样于250mL分液漏斗中，加入5g氯化钠，用50mL×3石油醚萃取。合并石油醚相，经过无水硫酸钠干燥后，用旋转蒸发器浓缩至近干，用石油醚定容到适当体积，待测。

3．2．1．2 糙米、稻壳、植株

合并滤液转移至500mL分液漏斗中，加入10g氯化钠，用50mL×3石油醚萃取，离心分层(5000r／min，20min)。吸取上层石油醚相，经无水硫酸钠干燥，用旋转蒸发器浓缩至3～4mL，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱内依次装入2cm无水硫酸钠、10g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠，用20mL石油醚预淋。将上述浓缩液转移至柱顶，用50mL乙酸乙酯／石油醚(5∶95，V／V)淋洗，弃去。再用80mL乙酸乙酯／石油醚(15∶85，V／V)洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发器浓缩至近干，用石油醚定容至2mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 NPD

色谱柱 HP-5，30m×0．32mm×0．25μm

检测温度 进样口230℃；检测器250℃；柱温120℃，1min，10℃／min，250℃，2min

载气 高纯氮，5mL／min

燃烧气 氢气，空气

进样体积 1μL，不分流进样

保留时间 8．7min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－11g。

最低检测浓度糙米、稻草和稻壳0．008mg／kg；田水0．001mg／L；植株0．004mg／kg；土壤0．002mg／kg。

回收率 糙米、稻壳、稻秆中添加异噁草酮0．02～0．5mg／kg时，平均回收率为82．8%～99．8%；鲜植株和土壤中添加异噁草酮0．01%～0．5mg／kg时，平均回收率为84．1%～97．5%；田水中添加异噁草酮0．005～0．1mg／kg时，平均回收率为93．3%～102．3%，见表3-12-1。

相对标准偏差 0．6%～13．3%，见下表3-12-1。

表3-12-1 糙米、稻壳、植株、土壤和田水中异噁草酮添加回收率及相对标准偏差实验结果