柑橘和土壤中残留量检测方法(方法一)

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湖南农业大学农业环境保护研究所

郭正元 赵卫星 刘毅华 郑丽英 杨仁斌 龚道新

样本用石油醚提取，弗罗里硅土柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

索氏提取器

组织捣碎机

旋转蒸发器

水浴恒温振荡器

层析柱Φ15mm×300mm

2．主要试剂

甲醇(色谱纯)、石油醚、丙酮、氯化钠

弗罗里硅土经650℃处理4h，加5%水减活

炔螨特标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 橘肉

称取50g橘肉，经组织捣碎成匀浆，置于250mL三角瓶中，加入50mL石油醚，振荡提取30min，减压过滤。滤液转移到500mL分液漏斗中，静置分层后，收集石油醚相。水相再用30mL、20mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水后，浓缩至2mL左右，待净化。

3．1．2 橘皮

称取20g切碎的柑橘果皮置于滤纸筒内，装入索氏提取器中，加入120mL石油醚，在水浴上回流提取4h。提取液脱水后，浓缩至2mL左右，待净化。

3．1．3 土壤

称取20g过20目筛的样本置于250mL具塞三角瓶中，加55mL石油醚／丙酮(1∶1，V／V)，浸泡过夜，振荡提取1h，抽滤。用少量石油醚／丙酮(1∶1，V／V)洗涤残渣2～3次。合并滤液，转入预先加有100mL2%硫酸钠溶液的500mL分液漏斗中，振摇1min。静置分层，收集上层石油醚相，水相再用30mL、20mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水后，浓缩至1～2mL，待净化。

3．2 净化

3．2．1 橘肉、橘皮

将装有6g弗罗里硅土的层析柱，用25mL石油醚预淋。将浓缩液转入柱中，用50mL石油醚／丙酮(98∶2，V／V)洗脱。收集全部冼脱液，用氮气吹干，甲醇定容至10mL，待测。

3．2．2 土壤

装有4g弗罗里硅土的层析柱，用25mL石油醚预淋。用50mL石油醚／丙酮(98∶2，V／V)洗脱。收集全部冼脱液，用氮气吹干，甲醇定容至10mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 225nm

色谱柱 ODS不锈钢柱，125mm×4．0mm

柱温 35℃

流动相 甲醇／水(80∶20，V／V)

流速 0．8mL／min

进样量 20μL

保留时间 4．40min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－8g。

最低检测浓度 橘肉0．05mg／kg，橘皮0．125mg／kg，土壤0．125mg／kg。

回收率 橘肉、橘皮中添加炔螨特0．05～2．00mg／kg时，平均回收率分别为91．9%～98．0%和90．3%～95．5%；土壤中添加炔螨特0．05～5．00mg／kg时，平均回收率为89．7%～99．1%。见表1-29-1。

相对标准偏差 1．1%～3．6%，见表1-29-1。

表1-29-1 土壤、橘肉和橘皮中炔螨特添加回收率及相对标准偏差实验结果