小麦籽粒、植株和土壤中残留量检测方法

---

农业部农药检定所 秦冬梅

北京化工研究院环境保护研究所 纪然 卜凡 阮虹 马恒麟 李媛

样本用乙腈或丙酮／水提取，液-液分配，硅胶柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

Milli-Q超纯水机

旋转蒸发器

调速多用振荡器

层析柱 6mm×420mm

2．主要试剂

丙酮、乙酸乙酯、正己烷(重蒸)、乙腈(HPLC)

无水硫酸钠 350℃烘4h以上

氯化钠 650℃灼烧4h以上

1mol／L氢氧化钠溶液

1mol／L盐酸溶液

层析硅胶 60～100目，130℃烘4h后使用

双氟磺草胺标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 籽粒、植株

称取20g样本(籽粒粉碎，植株剪碎)置于250mL具塞三角烧瓶中，用100mL乙腈振荡提取30min，抽滤。用40mL乙腈多次洗涤滤渣、三角烧瓶及抽滤瓶后，合并滤液于250mL圆底烧瓶中。用旋转蒸发器浓缩(≤40℃)至约2mL。

3．1．2 土壤

称取20g样本置于250mL具塞三角烧瓶中，用80mL丙酮和20mL水振荡提取30min，静置片刻，将上层清液经滤纸过滤于100mL带有刻度的量筒内，记录所收集的滤液体积V(mL)，用旋转蒸发器上(≤40℃)浓缩至无丙酮蒸出，残液约25mL。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

取100mL10%NaCl溶液，用1mol／L氢氧化钠溶液调节其pH≥10后，将上述残余液洗入250mL分液漏斗中。然后用30mL×2正己烷洗涤圆底烧瓶并转移至分液漏斗中，振摇洗涤两次，每次2min，静置分层后弃去正己烷相。水相用1mol／L盐酸水溶液调节pH≤3后，再用30mL×2乙酸乙酯洗涤圆底烧瓶并转移至分液漏斗中，振摇萃取两次，每次2min，静置分层。合并乙酸乙酯相，经无水硫酸钠过滤入150mL平底烧瓶中，并用15mL乙酸乙酯洗涤无水硫酸钠层，合并用旋转蒸发器(≤40℃)浓缩至干。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中用乙酸乙酯／正己烷(20∶80，V／V)湿法装柱，先后装入2cm无水硫酸钠、2g层析硅胶和2cm无水硫酸钠。将3．2．1中的残余物用0．4mL乙酸乙酯超声溶解，加入1．6mL正己烷混合均匀后转移至柱上并继续用乙酸乙酯／正己烷(20∶80，V／V)淋洗至60mL，弃去。再用乙酸乙酯／正己烷(30∶70，V／V)洗脱液淋洗，弃去前5mL，收集后30mL。用旋转蒸发器浓缩至干，用HPLC流动相定容至一定体积后，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 254nm

色谱柱 Kromasil C₁₈，4．6mm×250mm，5m

进样量 10～40μL

流动相 土壤样本测定，乙腈／水(30∶70，V／V)，流速0．3mL／min

植株和籽粒样本测定，乙腈／水(25∶75，V／V)，流速0．5mL／min

保留时间 8．4min(土壤中)；5．4min(植株和籽粒中)

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 4．0×10^－11g。

最低检测浓度 小麦籽粒、植株和土壤均为5．0×10^－3mg／kg。

回收率 小麦籽粒、植株和土壤中添加双氟磺草胺0．01～0．5mg／kg时，平均回收率分别为84．4%～92．5%、86．1%～91．6%和91．9%～94．7%。见表3-18-1。

相对标准偏差 4．1%～13．9%，见表3-18-1。

表3-18-1 小麦籽粒、植株和土壤中双氟磺草胺添加回收率及相对标准偏差实验结果