血痕性别测定

在人类细胞核中，有23对染色体，其中一对为性染色体，正常女性为XX，男性为XY，故测定血痕中白细胞的X或Y，可鉴定性别。正常女性的两条X染色体，其中一条在间期细胞核中呈异固缩状态，形成Barr小体，可通过各种染色法 (H·E染法Papanicolaou染法、核的硫堇染法等)染出。但由于Barr小体检出率不高，而且从遗传学观点，决定性别以是否存在Y染色体为标准，无Y者为女性，有一个Y者即为男性，不论X染色体数目多少。因此，在法医学上以检查Y染色质（也称荧光小体）为主。检验时将血痕用2滴10—20%醋酸溶解，离心沉淀，取混淀物作涂片，加甲醇固定，干后用0.5%奎林纳克林染30—60分钟，置于荧光显微镜下观察，阳性者可见荧光小体。新鲜血液多形核白细胞中Y染色质阳性率较高，男性66.8%，女性<1%。随着血痕陈旧度的增加，阳性率降低，但男女差异仍显著。此外，用放射免疫法(RIA)可作血痕中睾丸酮及雌激素的定量测定，以判定血痕的性别。

血痕性别测定

体细胞（包括白细胞）的第23对染色体为性染色体，正常女性为XX，男性为XY，故测定血痕中白细胞的X或Y，可以鉴定性别。
X染色质 正常女性的细胞核中有两条X染色体，只有一条具有活性；另一条在胚胎发育早期 (人胚第16天)已无活性，在间期细胞核中呈异固缩状态，形成一个新月形、大小1.2×0.7μm的、贴近于核膜内缘的浓染小体，称为X染色质(又称Barr小体)。若染色体异常，有多条X染色体时，仅一条具有活性，其余各条均呈异固缩状态，便有(n-1)个X染色质。正常男性只有一条X染色体(XY)，因具活性，故看不到X染色质(1-1=0)。正常女性的X染色质可见于任何大核的细胞，例如颊部、阴道、尿道上皮细胞和羊水细胞的涂片，以及各组织的石蜡切片，但出现率约20～40%(平均30%)。在多形核白细胞则见鼓槌样小体(又称Davidson小体)，呈球形，大小约1.5μm，出现率仅6/500。各种核染色法均可染X染色质，包括H.E.染法，Papanicolaou染法，Feulgen染法，Guard染法以及核的硫堇染法等。检验时可将血痕用盐水或醋酸浸出，作涂片，甲醇固定后，染色，油镜检查。但应注意各种人为变态：
❶技术错误，如将细菌污染或将膜皱缩误为X染色质，
❷分娩后3天内，母女X染色质出现率可降为4～5%,
❸固醇类激素治疗后及口服抗菌素后，均可减少。此外，X染色质的大小也有不同，如H.E。染色的小于石碳酸品红染色的，颊细胞的小于阴道细胞的。
由于X染色质检出率不高，有一定错误率，而且从遗传学观点，决定性别以是否存在Y染色体为标准，无Y者为女性，有一个Y即为男性，不论X染色体数目多少。故在法医学上以检查Y为主。
Y染色质 一些荧光物质能选择性地结合在染色体的固定位置上。如quinacrine（即阿的平）能使脱氧核糖核酸(DNA)的鸟嘌呤发生烃化，因而选择性地结合于富含鸟嘌呤及胞嘧啶的部位。实验证明，经quinacrine作用后，在中期分裂相的男性细胞核，紫外光下可见Y染色体长臂的远端部分发出强荧光。此种现象在间期细胞核也出现(出现率50%以上)，可见直径为0.3μm的强荧光小体，称为Y染色质，即Y染色体的长臂的一部分。利用此种特性，便可鉴别男性或女性细胞；在法医学上已普遍应用于血痕、体液斑、毛发等的性别鉴定，准确率达90%。女性细胞无Y染色体，但少数(平均5%以内)也可见荧光小体样斑点，其原因尚不明确，可能由于人为变态，或由于核上覆盖有细菌之故。
检验时将血痂刮出，加2滴10～20%醋酸溶解，离心沉淀，取沉淀物置玻片上作涂片，干后再用甲醇固定，用0.5%盐酸阿的平(quinacrine-2HCl)染10～20分钟，置于荧光显微镜观察。阳性者可见强荧光小体。新鲜血液多形核白细胞及淋巴细胞核中Y染色质阳性率男性50～80%，女性<1%，成人，新生儿脐带血均可判断性别。2年半的陈旧血痕，男性阳性率32.8%，女性1.2%;4年血痕，男性21.7%，女性1.3%，两者差异显著。
放射免疫测定法(RIA) 用本法可定量测定血痕中睾丸酮及雌激素，以判断血痕的性别。Stuver(1975) 认为此法较检查X或Y染色质优越，因为后二者要相当量的血痕，成薄层附在无孔的表面者才能测出。