血清脂蛋白检查

血清脂蛋白主要是脂质与球蛋白结合成的复合物，极小部分由脂肪酸与白蛋白结合。用免疫法、超速离心、电泳和比浊等法测出的主要是与球蛋白相结合的脂蛋白。脂质包括胆固醇、甘油酯、磷脂以及少量的游离脂肪酸、类固醇激素和脂溶维生素等。这些物质都不溶于水，必需与蛋白质结合为水溶性复合物后，才能被血液运送到全身，进行贮存或代谢。由于组成脂蛋白的脂质和蛋白的不同，脂蛋白的物理和化学性质也不同，据此可将不同的脂蛋白分离和定量，用以诊断脂质代谢紊乱性疾病和对脂质进行研究。临床常用于检查各种脂蛋白的方法有下列几种：
脂蛋白超速离心分划法 由于各种脂蛋白的密度不同，用超速离心法在26℃的、密度为1.063的氯化钠溶液中，超速离心24h以后所测得的漂浮系数(Sf，单位是10^-13cm·s^-1dyn^-1·g^-1)也不一样。利用这一性质，可用超速离心法将其分划成不同密度的四种脂蛋白： 乳糜微粒(CM)，密度(g/ml)<0.95,S_f>400；极低密度脂蛋白(VLDL)，密度0.95～1.006,S_f20～400；低密度脂蛋白(LDL)，密度1.006～1.063,S_f0～20；和高密度脂蛋白(HDL)，密度1.063～1.210,S_f为0。此法需有超速离心机等设备，操作也比较复杂，临床一般不采用。
脂蛋白电泳法 由于各种脂蛋白颗粒大小不一及其所含的蛋白种类、量以及等电点不同，因而在同一电场和碱性缓冲液中由阴极向阳极移动的速度不同。据此，利用电泳法可将各种脂蛋白分离，再用亲脂性染料如油红O或苏丹黑B等染色，然后用比色法或光密度计扫描法测定各种脂蛋白占总脂蛋白的百分数。也可直接以染色标本作半定量检查。电泳所用的支持物有滤纸、乙酸纤维素膜、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。后两种效果较好，分离出的脂蛋白比较清晰。应用此法，可将正常血清脂蛋白分为数类：
❶泳动速度最快的α脂蛋白，它位于血清蛋白电泳α₁球蛋白区带，相当于用超速离心法测出的高密度脂蛋白；
❷前β脂蛋白，它位于β球蛋白区带前，相当于极低密度脂蛋白。前β脂蛋白在以聚丙烯酰胺凝胶为支持物的电泳中，位于β球蛋白后，这是因此支持物有分子筛作用，可阻碍分子较大的β脂蛋白继续向前移动；
❸β脂蛋白，位于β球蛋白区带，相当于低密度脂蛋白；
❹乳糜微粒，移动最慢，几乎位于原点。血清脂蛋白电泳正常值常因民族、性别、年龄、饮食习惯和支持物不同而有一定差别。乙酸纤维素膜电泳正常值在男性： α脂蛋白21.6±6.8%、β脂蛋白60.9±6.0%、前β脂蛋白6.1±4.8%；在女性： α脂蛋白24±7.8%,β脂蛋白55.5±8.7%，前β脂蛋白2.1±2.0%。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中正常人可出现少量的乳糜微粒，其他支持物的电泳乳糜微粒多为阴性。在病理情况下可出现异常脂蛋白，如宽β脂蛋白，它可出现于Ⅲ型高脂蛋白血症。
β脂蛋白测定 β脂蛋白约占脂蛋白的70%左右，携带总血脂的65%左右，其中主要是胆固醇。由于测定脂蛋白的方法较为简便，故常以此作为血脂异常的筛选试验。测定的方法有比浊法、酶学法和免疫法等，其中以比浊法较简便和实用。比浊法的原理是β脂蛋白可与多价阴离子高分子化合物如肝素等在一定介质中形成复合物，后者遇钙、锰和镁等金属离子可发生沉淀，形成浊度，此浊度与β脂蛋白量成正比，可用比浊法测定其含量(其中包括前β脂蛋白)。正常值以脂蛋白计为300～500mg/dl。
一般情况下，血清α脂蛋白变化较小，前β或β脂蛋白变化较大，β脂蛋白中50%为胆固醇，所以血清胆固醇变化主要表现为β脂蛋白变化。前β脂蛋白中60%为内生甘油三酯，乳糜微粒之90%为外源性甘油三酯。血清中一种或几种脂蛋白浓度明显上升时称为高脂蛋白血症其本质仍为高脂血症，它可分为原发性和继发性两类。如能参考血清总胆固醇和甘油三酯测定，并结合脂蛋白电泳，可使高脂蛋白血症的分型更为确切。原发性高脂蛋白血症可分为五型（见表）。继发性高脂蛋白血症中乳糜微粒升高主要见于进食过量的脂肪、未控制的重症糖尿病等；β脂蛋白升高主要见于甲状腺功能减退症、肾病综合征、胆道阻塞、动脉粥样硬化、糖尿病和长期进食高胆固醇等； 前β脂蛋白升高主要见于糖尿病、肾病综合征、进高糖高热量饮食、脂肪肝、痛风和胰腺炎等。一般情况下，乳糜微粒与动脉硬化发病关系不大，β和前β脂蛋白具有致动脉粥样硬化作用，而α脂蛋白则具有抗动脉粥样硬化作用。

各型高脂蛋白血症的血脂分析特征

类 型		Ⅰ	Ⅱa	Ⅱb	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ
名 称		高乳糜微粒血症 脂肪诱发的高脂 蛋白血症	高β脂蛋白血症 家族性高胆固醇 血症	高β脂蛋白及前 β脂蛋白血症	宽β型脂蛋白血 症	高前β脂蛋白血 症 糖诱发型高脂血 症	高前β脂蛋白乳 糜微粒血症、 混合性高脂蛋 白血症
血清外观		乳白色 上层奶油盖 下层澄清	透 明	大多透明	大多浑浊	透明或浑浊	浑浊或乳白色 上层奶油盖 下层浑浊
脂蛋白变化		CM增多 VLDL正常或 轻度增高 LDL及HDL 减少	LDL显增 VLDL正常或 减少 HDL正常 CM正常	LDL增加 VLDL增加 HDL正常 CM正常	2/3病人有“宽 LDL” VLDL正常或 稍增 HDL正常 CM正常	VLDL中度或 显增 LDL和HDL 正常或稍减 CM正常	VLDL增加 LDL及HDL 减少 CM增加
血清 脂类	胆固醇	正常或稍增	明显增多	明显增多	稍增或增多	正常或稍增	稍 增
	甘油三酯	明显增加	正 常	稍 增	稍增或增多	增 多	增 多
附 注		胆固醇/甘油三 酯比值<0.2			需要超速离心法 证实有“漂浮 型β脂蛋白”	有时称“碳水化 合物引起的高 脂蛋白血症”	胆固醇/甘油三 酯常>0.15

高密度脂蛋白-胆固醇测定 临床常用多价阴离子沉淀法以测定高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)。在除去乳糜微粒的血清中，用能沉淀β和前β脂蛋白的多价阴离子剂如肝素-锰或钙，使β和前β脂蛋白沉淀，然后测定上清液中的胆固醇含量，即血清高密度脂蛋白中胆固醇。正常值男性为58.9±10.1mg/dl，女性为69.0±13.1mg/dl。高密度脂蛋白的颗粒小，它含蛋白质50%、卵磷脂25%、胆固醇20%、甘油三酯5%。由于其分子小、亲水性强，可以通过细胞间隙，将肝外的胆固醇运送到肝脏。组织胆固醇含量与血清高密度脂蛋白中胆固醇之间有明显的负相关。动脉组织内可交换的胆固醇低，则血清高密度脂蛋白-胆固醇高。动脉粥样硬化的发生率及其危险性与高密度脂蛋白-胆固醇也呈负相关。高密度脂蛋白具有抗动脉粥样硬化作用，它能激活血中卵磷脂胆固醇酰基转移酶，使酯化的胆固醇入肝脏经胆汁排出； 还有抑制组织细胞摄取和蓄积低密度脂蛋白的作用。若血中高密度脂蛋白降低，可使沉积于动脉壁的胆固醇进一步固定，加速动脉粥样硬化的发生。
脂蛋白X测定 脂蛋白X(LPX)是在阻塞性黄疸时血清中出现的一种异常脂蛋白，含有蛋白质6%、磷脂65%、酯化胆固醇2%、游离胆固醇25～30%、甘油三酯很低。它可能是由于阻塞性黄疸时，卵磷脂胆固醇酰基转移酶受抑制而出现的异常脂蛋白，胆道阻塞解除后，卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性恢复，此种脂蛋白随即消失。测定时应用琼脂凝胶电泳法，利用它等电点高的特性，在pH8.6缓冲液的电泳条件下，脂蛋白X泳向阴极，最后进行染色测定。正常人为阴性。阳性见于阻塞性黄疸，肝外阻塞性黄疸较肝内阻塞性黄疸更明显。卵磷脂胆固醇酰基转移酶缺乏时，脂蛋白X亦为阳性。