螺原体病honeybee spiroplasmosis

由螺原体引起的一种蜜蜂传染性病害。在中国有些地区每年5月是发病高峰期，又称“五月病”。1977年美国T.B.克拉克在马里兰州分离到一株螺原体，它能引起蜜蜂发病，使36%的蜜蜂死亡，随后在法国、秘鲁和美国其他各州以及中国也从病蜂分离出螺原体。
病原 螺原体(spiroplasma)它是一种螺旋纤维状、能运动、无细胞壁的原核生物（见图），具有与一般霉形体（支原体）相同的细微结构。中国大陆从病蜂分离出的一株螺原体CH-1菌株，具有典型的螺原体形态结构和运动性。螺原体菌体直径0.17微米，长度随不同生长时期而变化，在固体R-2培养基上形成直径75～210微米的近圆形或圆形菌落。CH-1菌株生长温度范围25～37℃，最适温度为28～32℃，最适pH为7.0，渗透压0.25摩尔/升蔗糖浓度在最适生长条件下48小时达到生长高峰， CH-1生长需要提供血清。并受毛地黄苷的抑制。

蜜蜂螺原体(×1×10⁴)

传播 T.B.克拉克认为蜜蜂螺原体具有传染性，其传染源来自植物的花。因为从植物花上分离出来的螺原体，对蜜蜂具有感染力，使蜜蜂患病死亡。蜜蜂食入带有螺原体的饲料时，最初蜜蜂出现呆滞、迟钝，3天后在血淋巴中可以看到螺原体，不超过7天就会死亡。即使在室温暴露20天低浓度的病原培养物，蜜蜂食入以后也会引起死亡。当然，也不排除在植物开花泌蜜期，其他昆虫带菌者吸取花蜜时，将螺原体传递给植物，当蜜蜂采集花蜜时被感染。
症状 罹病蜜蜂爬出箱外，不能起飞，在地上爬行，蹦跳，爬出的病蜂上午多于下午，阴雨转晴时增多，蜂箱前遍地死蜂，死蜂双翅展开，喙吐出。由于这种病多与其他蜂病并发，因此病蜂肠道变化不尽相同，或中肠白色肿胀，或变褐色缩小，后肠中或积臭粪，或积绿水。在发病严重时，成年蜂、青年蜂，甚至刚出房不久的幼龄蜂都相继爬出箱外，群势骤减。
诊断 用直接镜检、分离培养和血清学反应方法进行确诊。
直接镜检 取待检蜜蜂5只，放在研钵内，加无菌水5毫升，研磨、匀浆，于5000转每分离心5分钟，取上清液涂片，置暗视野显微镜下放大1500倍观察，螺原体形态清晰可见，在原地旋转。
分离培养 分离所用的培养基是由C-3G培养基稍加减化后的R-2培养基，主要成分是牛心浸出液干粉、蔗糖、马血清和酚红，调节酸碱度pH 7.2～7.4，固体培养基加0.8～1.0% (W/V)琼脂。
诊断时，先从蜂箱地上采集濒于死亡的爬蜂带回实验室分离。整个蜜蜂用1%次氯酸表体消毒2～5分钟，再用无菌水冲洗两三次。从腹部剪开，取出内脏，在2毫升R-2培养基内磨碎或洗涤，用孔径0.45纳米的微孔滤膜加压过滤。将滤出液加入R-2培养基，于30℃下培养，逐日观察培养基颜色变化，并用暗视野显微镜检查证实。
血清学检查 用液体培养的螺原体经离心洗涤后，用超声波击碎菌体，加入等量的完全佐剂免疫家兔，制备抗体血清。
用生理盐水将琼脂配成0. 65% (W/V)，加入0. 5%(W/V)十二烷基硫酸钠(SDS)和0. 15%(W/V)叠氮钠，溶化后制成厚约5毫米的琼脂板。反应孔(直径5毫米)打成梅花形分布，孔间距4毫米。中间孔加抗血清，周围孔加入待检抗原，并以标准抗原和PBS作对照。置32℃下48小时，观察结果，在待测抗原、标准抗原与抗血清之间均出现一条乳白色沉淀带时，即为阳性。
防治 以预防为主，平时饲养强群，留足饲料，注意场地和蜂具的消毒，防止并发症的出现。一旦蜜蜂螺原体病与孢子虫病、麻痹病并发时，蜂群发病快，病情严重，死亡率高。在治疗上可采用抗生素，如1000毫升糖浆(糖与水为1:1)中加入四环素20万单位或红霉素10万单位。先用温水将药物溶解，再加入糖浆中，搅拌均匀，每群(10框群)喂药物糖浆150毫升，每隔5天喂1次，直到病群恢复健康为止。巢脾可用5%氯化碘溶液，或3%过氧化氢溶液和3%甲酸（或醋酸）溶液消毒24小时。然后除去巢房内的有毒液，用清水冲洗晾干，即可使用。