蜂蛹病honey bee pupa disease

由蜜蜂蛹病毒引起的蜂蛹传染病。1982年在中国云南、四川省个别蜂场饲养的西方蜜蜂中开始发现，1985年以后在南方一些省区爆发流行，造成不同程度的危害。1986年蔓延至12个省区，1987年扩展到20个省区，在四川乐至、安徽宿松饲养的中华蜜蜂中也发现蜂蛹病。患病蜂群采集力和王浆分泌能力显著降低，严重病群完全失去生产能力，甚至造成全群死亡。这种病以云南、四川、江西、浙江较为严重。世界其他养蜂国家尚未见报道。
病原 蜜蜂蛹病毒(honey bee pupa virus)，是中国首次发现的一种蜜蜂新病毒。病毒粒子球形（见图），直径20纳米。沉降系数为50.8S，核酸为双链RNA型，在10%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示出6条核酸带，分子量分别为0.675×10⁶到0.944×10⁶。一条病毒蛋白质组分，分子量为25.8×10³。其病毒在病蛹的中肠、头部及病蜂王卵巢细胞中增殖，它与蜜蜂囊状幼虫病病毒、蜜蜂麻痹病病毒等其他蜜蜂病毒均无血清学关系。这种病毒不仅感染西方蜜蜂，也感染中华蜜蜂。
症状 死亡工蜂蛹大多呈干枯状，体色暗淡，发病初期蛹体由灰白色逐渐变成浅褐至深褐色，死蛹呈暗黑色，尸体无臭味，无粘性，多数巢房盖被工蜂咬破，死蛹露出头部呈“白头蛹状”。也有的发育到成蜂阶段死于巢房内。

蜜蜂蛹病毒(×3×10⁶)

诊断 根据蜂群内出现的典型症状、电镜观察和血清学检验进行诊断。
如发现蜂箱外有拖出的死蜂蛹或不健全的幼蜂、子脾失去正常光泽、出现“插花子脾”、巢房盖被咬开的死蛹等症状，可初步诊断为患蜂蛹病。
进行电镜诊断的方法是，取自然感病的蜂蛹，按每只蜂体加等量的pH7.2、0.01M的磷酸缓冲液和1/10体积的乙醚、四氯化碳，制备成乳浆，经差速和蔗糖梯度离心，制备悬浮液和电镜片，并经磷钨酸负染，置电镜下观察，若发现大量均一的约为20纳米的球形病毒粒子，即可确诊。
血清学诊断方法有二：
❶琼脂免疫双扩散法。以pH8.6、0.05M巴比妥缓冲液制备成1.5%的琼脂板，梅花型打孔，中间孔加蛹病毒抗血清，周围孔加待检测样品，常温下自然扩散24～48小时，出现沉淀线者为阳性，否则为阴性。

❷对流免疫电泳法。以pH8.6、0.025M巴比妥缓冲液制备成1.5%凝胶琼脂板，双排打孔，左侧加抗体，接正极，相对孔加待检测样品，接负极，电压100mV/cm，电流强度10mA/cm，电泳30～60分钟，出现沉淀线者为阳性，否则为阴性。
发生规律 发病与温度关系较密切，通常以春季发生为重。在中国云南、福建发病出现在1～2月，四川2～4月，江西、浙江3～4月，陕西4～6月，甘肃6—8月。适宜发病的温度为10～21℃，早春寒潮过后，易造成流行。当春、秋季外界蜜源缺乏，蜜蜂处于饥饿状态，或采用劣质饲料糖喂蜂，造成蜜蜂消化不良，此时，如出现寒潮或阴雨，便可诱发蜂蛹病。蜜蜂品种之间抗病性有差异，在西方蜜蜂种之间，意大利蜂抗病力较差，发生普遍，受其危害较严重；卡尼鄂拉蜂和东北黑蜂抗病力较强，发病较轻；中华蜜蜂则很少发病。老龄蜂王群易感病，年青蜂王群发病较轻。
防治 措施有：❶选育抗病品种，更换蜂王。由无病蜂场选择采集力强、繁殖性状优良的蜂群培育蜂王，用以更换病群中的蜂王，增强对蜂蛹病的抵抗力。
❷加强饲养管理，创造适宜蜂群繁殖和发展的环境，保持蜂多于脾和充足的饲料；勿将病群中的巢脾调入无病群；将蜂群外面的死蛹集中烧毁，以消灭传染源。
❸秋末冬初对换下的蜂箱及其他小型蜂具用火焰喷灯灼烧消毒，以高效巢脾消毒剂浸泡巢脾。
❹蜂群用酞丁胺复合制剂喷喂，每三天1次，21天为一个防治疗程，即可治愈。