自溶血试验

自溶血试验是将脱纤维蛋白血在无菌条件下温育后，观察其溶血程度的一种试验法。正常人一般只出现极轻度溶血。若红细胞膜的结构和酶出现异常时，则自溶血超过正常。膜结构异常是由于膜的脂蛋白发生了质和量的改变，致使通透性增加，易发生溶血。由这一原因引起的自溶血增加多伴有红细胞外形的变化，如呈球形、椭圆形、棘形等。酶异常包括糖酵解和磷酸戊糖旁路及有关谷胱甘肽代谢酶的缺陷。糖酵解酶中以丙酮酸激酶最易出现缺陷，其主要的影响是不能供给红细胞生理活动所需的能量，使ATP降低，其结果是谷胱甘肽减少，不能保护细胞膜上的血红蛋白中的HS基不被氧化，导致细胞膜功能损害和血红蛋白变性，使红细胞易于自溶。自溶血试验可作为鉴别溶血性贫血性质的初步试验。观察葡萄糖和三磷酸腺苷(ATP) 纠正试验对自溶血试验的影响，以鉴别引起自溶血的原因。
自溶血纠正试验是将被检者的脱纤维蛋白血，置37℃温育24h，将血液混合后再继续在37℃中温育24h。观察结果时，先测红细胞比积(Hct)，再分离血清，根据溶血程度加氨水将之稀释若干倍。以540nm波长比色，读取光密度。以未经温育而贮于4℃冰箱中被检者的脱纤维蛋白全血加氨水稀释作为100%溶血，读取光密度。同时分离血清，加氨水将其稀释至与温育血同样的倍数作为空白。按下式计算溶血率。

在进行此试验的同时，还可将葡萄糖液和ATP液分别加至被检者脱纤维蛋白血中，温育后按上法操作观察溶血率。正常人自溶血率<3.5%(温育48h)，加入葡萄糖或ATP后<0.6%。
球形红细胞增多症，如遗传性球形红细胞增多症、椭圆形红细胞增多症、棘形红细胞增多症和口形红细胞增多症等自溶血试验溶血率明显增加，由于该类疾病红细胞内酶正常，能够利用葡萄糖产生ATP，加入葡萄糖或ATP后溶血都能被纠正。非球形红细胞溶血性贫血可分为两型：Ⅰ型包括葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症、己糖激酶缺乏症、磷酸甘油变位酶缺乏症和磷酸丙糖异构酶异常症等，自溶血试验也可为阳性，但一般溶血率较低，阳性者加入葡萄糖后溶血可被纠正；Ⅱ型主要疾病是丙酮酸激酶缺乏症，自溶血试验的溶血率显著增加，由于不能利用葡萄糖产生ATP，加入葡萄糖溶血不能被纠正，但加入ATP溶血则可被纠正。自身免疫性溶血性贫血自溶血试验为阳性，一般不被加入葡萄糖或ATP所纠正。