点滴法topical application

将定量药液点滴在昆虫体壁的一定部位，使杀虫剂穿透表皮引起昆虫中毒致死，以测定触杀毒力的杀虫剂生物测定方法，又叫滴加法。于1980年被联合国粮农组织(FAO)推荐为鳞翅目幼虫抗药性标准测定方法。可应用于多种试虫的触杀毒力测定，如蚜虫等微小试虫也可采用此法。
简史 特里万(J.W.Trevan)于1922年首先发明了微量注射器（滴加器），它是用一个螺旋推动千分尺进而推动注射器的内柱，从针尖上挤出液滴来(图1)。后来虽然作了各种改进，但基本原理相同。近年

图1 微量点滴器的构造
(据J.W.Trevan)

来英国伯卡德(Burkard)公司生产的阿诺德(Arnoed)电动（手动）微量点滴器及埃斯科中型(ISCO ModelM)微量注射器，操作更方便、点滴更精确。前者的最小容积为0.1微升，后者的容积可达0.004微升。龚坤元等于1963年设计一种更简单的毛细管微量点滴器，点滴量可小至0.03微升，后改用不锈钢细管代替玻璃毛细管，具有不易破碎、通透性强，点滴量精确等优点(图2)。
特点 优点是： ❶精确度高，试验误差小，每头虫体点滴量一致，可准确计算出每头试虫或每克试虫体重的用药量；
❷用药量少，用试虫数也少；
❸可避免胃毒作用的干扰。缺点是： ❶对试虫生理状态要求更严。须用同性别、同年龄、同一饲养方法获得的生理状态一致的目标昆虫为试虫；
❷点滴部位及大小不同会引起毒效差异。一般来说，点滴部位越接近作用部位，毒效越快、效果越显著，所以一般要求点滴大小和部位一致，以点滴在前胸或腹部背面为宜；
❸处理前试虫的麻醉方式及时间对试验结果亦有很大影响，一般用CO₂或乙醚麻醉均可，但处理时间要控制一致；
❹使用毛细管微量点滴器点滴蚜虫时，点滴技术要求高。

图2 毛细管微量点滴器
(据龚坤元，1963)

方法与步骤 根据所用点滴器的不同可分为：微量点滴法 用丙酮溶解杀虫剂配成母液，再按等比级数稀释成系列浓度备用。取下注射器，吸取丙酮药液后，使注射器垂直倒立排出气泡。安装注射器时，应使注射器的内轴与千分尺的中心轴成一直线并贴紧，转动千分尺至针尖出现液体时，就可按照定量形成药液，点滴目标昆虫(针尖要磨平弯曲成45°或90°角(图1)。点滴药量计算是测微尺每转一圈50格、向前推进0.5毫米，每转一格只推进0.01毫米。如容积为1毫升的注射器，长度为32厘米，从下式可知，每推进一格的药量为0.31微升。

测定时可根据虫体大小，确定一定格数的药液量进行点滴。如点滴虫体大的试虫，可采用微量点滴仪，点滴范围从0.1～ 3.5微升不等。
毛细管微量点滴法 将毛细管插入盛装丙酮药液的小瓶中，使尖端接触药液（毛细管上端的玻璃管不可按触药液）; 当整个毛细管充满药液后，再点滴于虫体适当部位。应在毛细管尖端接触试虫体壁（不可使虫体受伤）时，挤压橡皮头，使药液排到虫体上； 点滴完毕后，将试虫置于适宜温湿度条件下饲养，隔一定时间检查效果。(见彩图23、24)

点滴法toppical application

害虫生物测定方法之一。使用毛细管微量点滴器(0.02～0.5μl)或微量注射器(0.1～2.0μl)将微量的药液点滴在昆虫的胸腹部背面。因虫种不同，选择不同容积的点滴器，以获得适宜点滴量。如棉铃虫6龄幼虫点滴1μl,3龄幼虫0.05μl，褐飞虱长翅型成虫使用0.025～0.05μl，棉蚜无翅成虫0.02～0.04μl。测定方法是将药剂溶于丙酮配制5～6个浓度药液，每个浓度点滴30头，重复三次，24或48 h后观察结果求得LD-p线及LD₅₀值。此法是最准确的触杀剂毒力测定方法，在FAO推荐的杀虫剂14种抗药性测定方法中有10种采用点滴法。