灭菌sterilization用物理或化学的方法,完全除去或杀死器物表面和内部微生物的操作技术。灭菌是微生物学研究工作的基本操作。灭菌方法有热力灭菌、过滤除菌、化学药物杀菌和辐射灭菌等。 热力灭菌 加热使微生物体蛋白质凝固,酶系失活而致死。致死的热力剂量是温度与时间的乘积。致死温度是指一定时间(通常10分钟)内杀死某微生物所需的最低温度; 致死时间是在一定温度下,杀死某微生物所需的时间。杀死一种微生物的热力剂量,随细胞结构、组成成分和含水量而不同,如细菌芽孢具厚壁,孢壁中含有抗热性的吡啶二羧酸,孢内含水量低,热致死量远高于其营养细胞。利用高温杀菌是最常用的灭菌法,又可分为干热灭菌和湿热灭菌两种方法。 干热灭菌法 灭菌的对象是不含水能耐高温并忌湿的物品,如玻璃、搪瓷、金属器械等。被灭菌的物品必须完全干燥,在干热箱中加热至160℃持续2小时,或180℃维持1小时。通常在微生物学操作中,一些接种工具和玻璃器皿的管口通过火焰烧灼,也是一种干热灭菌方法。 湿热灭菌法 热蒸汽的扩散力和穿透性强,可以在较短时间内得到灭菌效果。棉织品、食品以及溶液和培养基等都以湿热灭菌为宜。在常压100℃的蒸汽中,各类微生物的营养体都可被杀死,但抗热性强的各类休眠体,短时间内未必能被杀死,常采用间歇灭菌法和加压蒸汽灭菌法,以达彻底灭菌的目的。 间歇蒸汽灭菌法 在常压流动蒸汽中,分三次在连续三天内进行,适用于不耐100℃以上高温的物品和有机溶剂。每次加热至100℃持续30分钟后,取出置30℃中培养24小时,使未被杀死的芽孢和其他休眠体等萌发,在下一次加热时致死。 加压蒸汽灭菌法 在密闭耐压的灭菌锅中,增加蒸汽压,提高蒸汽温度,加强热穿透力,缩短灭菌时间,以迅速彻底灭菌。培养基、罐头制品、发酵装置以及手术用具等都用这种方法。保持灭菌锅内蒸汽压0.5千克/厘米2 温度115℃,维持30~60分钟或1.0千克/厘米2温度121℃,维持20分钟,可达到灭菌要求。但若被灭菌物品堆积紧密时,应延长灭菌时间。 化学药物杀菌 应用杀菌药物,破坏微生物的细胞结构或使其酶类失活,阻扰正常代谢而致死微生物。药物杀死作用与药物种类、浓度和处理时间,以及微生物种类对药物的敏感性有关。常用的一些消毒剂在较高浓度时,也有杀菌作用。 醛类 还原氨基酸,蛋白质烷基化而达到灭菌目的。常用有甲醛、戊二醛。主要用于房间熏蒸灭菌。常用量36%甲醛25ml/m3,保持12~24小时。因甲醛对皮肤和粘膜有强刺激作用,作业环境中最高许可浓度为4ppm (5mg/m3)。 杂环类 环氧乙烷的衍生物,使蛋白质分子烷基化,干扰酶的正常代谢而致死微生物。常用于粮库、医疗和防疫用品熏蒸灭菌。 重金属盐类 常用有汞、银和碘等金属盐类,能使蛋白质凝固,与酶活性基团结合,抑制正常代谢致死微生物,常用于皮肤和器皿的表面杀菌,如碘酊和红汞。 染料类 有良好的表面活性,解离度高,易与蛋白质结合成不能电离的化合物,用于伤口洗涤和涂抹,如常用的龙胆紫。 辐射灭菌 利用非电离辐射如红外线,微波致死微生物; 电离辐射如紫外线、α-射线、γ-射线等通过离子化干扰代谢,引起酶系统紊乱而致死微生物。紫外线能引起光化学反应产生过氧化氢和有机过氧化物杀死微生物,以2 500~2 650A波段杀菌力最强。紫外线对皮肤和粘膜有刺激作用,应避免直接在紫外线下进行操作,α-射线和γ-射线可引起核酸和蛋白质的变性破坏,常用于诱变育种。 过滤除菌 具有生理活性的物质常用过滤的方法除去微生物。当滤孔小于0.2μm时,可除去病毒以外的所有微生物。 灭菌sterilization完全除去或杀死材料中或物体上所有微生物个体及其孢子的作用。经过灭菌的材料或物体达到无菌状态。无菌的标准是没有任何具有繁殖能力的微生物个体存在。常用物理的或化学的方法进行灭菌,如加热灭菌、紫外线照射灭菌、甲醛薰蒸灭菌等。对不同的材料采用不同的灭菌方法,玻璃器皿等可以用干热空气灭菌;而培养基则多采用湿热蒸汽灭菌。血清制品等需保持其生物学活性而无法用常规灭菌法处理,因而采用过滤除菌使其达到无菌状态。 灭菌sterilization将物体上所有微生物的繁殖体和芽胞全部杀灭,叫灭菌。灭菌方法很多,主要有物理性与化学性两大类,其中各又有多种,目前应用较多的有高温高压灭菌法和化学药物灭菌法,其他可由于目的与要求不同,则分别采用较适用的方法。灭菌在医疗手术、穿刺及各种检查中应用甚广;在化工企业、制药业亦大量应用;在饮食品加工业,某些生产企业、科学研究中亦被广泛应用,因此灭菌手段亦不断发展、进步。 灭菌见“医药卫生”中的“灭菌”。
灭菌杀灭物品中所有微生物(包括致病、非致病的及芽孢)的措施。方法随物品性质而异。常用的有物理性的(如高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法等)和化学性的(如用卤素、烷化剂等灭菌)两大类。在日常工作中,“消毒”和“灭菌”这二术语常通用。 灭菌杀灭体外环境中某些物体上的一切病原体和非病原体的措施。 灭菌sterilisatio是指杀灭物体上所有微生物(包括病原微生物及非病原微生物、细菌的繁殖体及芽胞)的方法。 灭菌 灭菌sterilization杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高,包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 ☚ 消毒 抑菌 ☛ 灭菌sterilization |