核酸酶S1保护分析法nuclease S1 protection assay

核酸酶S1能专一性地降解单链DNA和RNA，而不能降解DNA/RNA杂交双链。采用M13噬菌体体系克隆和扩增特定基因的单链DNA片断，在合成过程中加入核素标记物，即可合成高放射性的单链DNA探针。将探针与待测RNA样品在液相中进行杂交，形成DNA/RNA杂交双链。在杂交后的反应体系中加入核酸酶S1进行处理，未与RNA结合的单链DNA被降解，DNA中的内含子部分不能与RNA结合而形成游离环状，也被核酸酶S1降解。剩余的DNA序列即为与RNA互补的序列。可用于基因转录起始点分析及内含子剪切位点的分析。