杀线虫剂生物测定bioassay of nematocides

利用线虫与药剂接触，根据线虫的反应情况，来判断杀线虫剂毒力的农药生物测定。
简史 1928年彼得斯(B.G.Peters)讨论了化合物的实验室测定。1939年奇特伍德(B.G.Chitwood)提出了 一种快速测定杀线虫剂的k值方法。1945年古迪(T.Goodey)做了溴甲烷的实验室测定，将感染茎属(Ditylenchus dipsaci)的小量种子标本暴露在装有已知量溴甲烷的密闭瓶中，测定熏蒸剂杀线虫效果。从40年代初期到60年代初期，主要是进行熏蒸性杀线虫剂的生物测定，60年代中期以后，开始了触杀性杀线虫剂的生物测定研究。
测定方法 根据药剂的作用特点有熏蒸、触杀和内吸三类方法。各类方法有所不同，但在选用供试线虫种类时，都应考虑到它的活动性和对农业生产的价值。应选用容易培养，且对农业影响大的线虫作试材。一般可采用小杆线虫(Rhabditis spp.)、根结线虫(Meloidogynl spp.)、孢囊线虫(Heterodera spp.)、根腐线虫(Pratylenchus spp.)、滑刃线虫(Aphelenchodesspp.)等。
熏蒸毒力测定 按用药方式可分两种方法： ❶ 把供试药剂以不同剂量装入密闭容器中，使其不与供试线虫或感染线虫的植物组织直接接触，而让其在空间自行扩散。每一处理重复四次，以不放药为空白对照，在一定的温度下培养24～ 48小时后，检查线虫死亡率。植物组织作试材，需要剖开检查。
❷把供试药剂以不同剂量分别注入盛有等量感染根结线虫的病土容器中，重复四次，以不放药为空白对照，经一定温度和时间（时间长短视药剂的性能而定）后，种植西红柿或花生种子，待幼苗长至5～7厘米高时，按毒力级别，检查根部感病程度和根瘤数量，比较毒力大小。
触杀毒力测定 有点滴、混土、土壤淋浴三种方法。❶点滴法： 把供试药剂以不同浓度分别滴加于凹型玻璃板上，放入二龄幼虫，每一浓度重复四次，以不放药为空白对照，置24℃(75°F)温度培养，24小时后检查线虫死亡率。
❷混土法： 把供试药剂以不同剂量分别与等量自然感染根结线虫的病土混匀，混前应测病土中线虫含量。其他做法与熏蒸毒力测定方法
❷相同。
❸土壤淋浴法： 选用无毒的壤土或蛭石，装入相同大小的花盆中，种植西红柿或花生种子，待幼苗长至5～ 7厘米高时，把供试药剂以不同浓度分别淋土处理，每一处理至少四盆，并以不淋药为空白对照，24小时后，每盆用2毫升含500条 二龄根结线虫液淋土，两星期后检查根部被感病程度和根瘤数量，比较毒力大小。
内吸毒力测定 按用药方式分两种方法。❶ 下导性法： 其方法与触杀毒力测定的土壤淋浴法相似，不同之处是下导性法是把药液喷洒在植株的地上部分，药液不能接触土壤。
❷上导性法： 其方法与触杀毒力测定的土壤淋浴法相似，不同之处 一是药液不能接触植株地上部位，二是把食叶性线虫接于作物的叶片上。
毒力表示方法 表示方法有两种。一种是以线虫存活数量分为4级。Ⅰ级： 死亡率大于或等于90%;Ⅱ 级：死亡率在 70 ～ 89%;Ⅲ级： 死亡率在50～ 69%;Ⅳ级： 死亡率小于50%。调查的结果用阿博特(Abbott)公式校正。

另一种是以寄主感病程度分4级。0级： 寄主无病；Ⅰ级： 寄主感病（或根瘤）Ⅰ～20%;Ⅱ级： 寄主感病（或根瘤）21～ 50%;Ⅲ级： 寄主感病（或根瘤）51～100%。