排阻色谱法

排阻色谱法又称凝胶过滤、凝胶色谱法、分子筛色谱法、凝胶渗透色谱法。主要利用化合物分子的形状和大小不同进行分离，固定相为化学惰性的多孔性物质——凝胶，常用的有葡聚糖凝胶。凝胶的孔径大小决定了可分离的组分范围，因此在生产凝胶时可控制其交联度，从而控制其孔径大小，交联度大者孔径小，不同规格适用于不同分子量，分离时需选用适宜的孔径。使用葡聚糖凝胶等亲水性凝胶时，以水溶液为流动相，又称凝胶过滤法。使用有机高分子聚合物如聚苯乙烯凝胶时，以有机溶剂为流动相，称为凝胶渗透色谱法。分离时小分子可渗透进入孔中被滞留，大分子则完全不能进入，因而各种分子得到分离。本法主要用于分离多肽、蛋白质、核酸、酶、多糖等大分子物质，并测定它们的分子量，也可用于分离其他有机物和无机离子。
本法特点是设备简单、分离效果好； 凝胶可重复使用，不需繁复的再生处理；分离条件较缓和，不致引起蛋白质变性或酶失活。缺点是分离速度较慢。近年来发展有高压凝胶色谱法，使用高压输液泵及小颗粒耐压凝胶，不仅使分离速度加快，而且分离效能也大大提高。