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亦称反相色谱法。指固定相为非极性，流动相为极性的分离系统。该法适用于分离从极性到非极性较宽范围内的化合物。在反相分配色谱过程中，极性大的组分先出峰，极性小者后出峰。增加流动相的极性或离子强度，则洗脱能力降低。
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