分支杆菌检查

分支杆菌是一类菌体细长、呈分支排列的杆菌。用一般染色法不易着色，必须经加热延长染色时间，方能着色。因其有抗酸性乙醇脱色作用，故又称抗酸杆菌。它的种属较多，致病的分支杆菌，主要是结核杆菌、麻风杆菌和非典型分支杆菌。临床上检查的主要是结核杆菌和麻风杆菌，用以作为诊断结核病和麻风病的依据。
结核杆菌检查 结核杆菌有人、牛、鸟和鼠等型，人型是人类结核病的主要病原菌，牛型也能使人致病。人体几乎所有组织，都能感染结核杆菌。结核病人的各种分泌液、渗出物、坏死脱落的组织，以及活检标本，都可能检出结核杆菌，故可送检痰、尿、胃液、粪及各种穿刺液、腔道分泌液和脓液等。常用检查法如下。
直接涂片检查： 将标本直接涂片，以抗酸染色法染色，常用的是Ziehl-Neelsen法。将染好的片子置显微镜下以油浸镜查找。分支杆菌呈红色细长微弯杆菌，单个散在或平行排列。非分支杆菌为蓝色。用金胺或核黄素染色时，分支杆菌在荧光显微镜下现黄绿色荧光，此法较为快速，是其优点。在各种穿刺液和痰中，如发现有以上染色特性的细菌，则结核杆菌的可能性较大，因在此类标本中存在腐生性分支杆菌的机会很少。如在尿中查到抗酸杆菌，则需鉴别是结核杆菌还是污染的腐生性分支杆菌。Pappenheim染色法具有鉴别作用，经此法染色后，结核杆菌仍被染成红色，而耻垢杆菌等腐生性分支杆菌呈蓝色。一般认为菌量达104/ml以上，方能在涂片中找到结核杆菌。为提高发现率，常先将痰和尿中的结核杆菌，用漂浮或沉淀法进行浓集。
培养： 由于结核杆菌生长缓慢，要求营养条件高，若送检标本中混有其它细菌，培养容易失败，故在标本中应先加入适量消化液以消灭杂菌。然后将标本接种于液体或固体培养基。结核杆菌常须培养2～4周始出现菌落。4周后为阴性者需继续观察至8周，如仍然阴性方可报告为“经8周培养未见结核杆菌生长”。经过抗结核治疗的细菌，其活力一般减弱，生长更加缓慢，个别菌株可在8周以后才出现菌落，故8周培养阴性者也不能完全排除结核病。
动物接种： 被接种的动物常选用豚鼠或地鼠，将经过预处理的适量标本注于动物腹腔，阳性者，于接种后2～3周，动物腹股沟淋巴结肿大、坏死、全身状态欠佳。取局部病灶组织或脓液涂片，行抗酸染色检查，可查到抗酸杆菌。动物死亡时，应作解剖观察病变，结核杆菌感染致死者，应有结核性病变和找到抗酸杆菌。
此外，还有血清学检查法如凝集反应和补体结合试验等，对诊断结核病都不够满意。
麻风杆菌检查 因缺乏临床实用的培养方法，故目前仍以直接涂片用显微镜检查细菌形态为主。标本应采自有病变损害的部位，如用切开皮肤后刮下的组织作涂片和鼻粘膜印片等。用抗酸染色法染色后在显微镜下检查。麻风杆菌形似结核杆菌，有的菌体稍粗，呈红色。常存在于组织细胞内。
非典型分支杆菌检查 此种细菌属腐生性分支杆菌，菌种庞杂。当人体抵抗力减低时，它可引起结核样病变，主要侵犯肺部和颈淋巴结。在抗酸染色的涂片上其形态与人型结核杆菌无法区别，但可根据此菌初次培养生长缓慢、次代培养生长良好迅速、不产生色素、菌落光滑及对动物的致病力弱等特点加以鉴别。已感染非典型分支杆菌的患者对结核菌素的反应性较弱，但对同型的非典型分支杆菌的反应性却很强。