免疫印迹法Western blotting

又称“Western印迹法”。它将凝胶电泳技术与固相免疫技术相结合，把电泳分区的蛋白质转移至固相载体，再用酶免疫、放射免疫等技术测定。该法能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子量，常用于检测多种病毒的抗体或抗原。例如该法检测血清HIV抗体是HIV感染的确认实验之一。第一步，将HIV用离子去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)裂解病毒结构蛋白，然后用聚丙稀酰胺凝胶电泳(PAGE)将分子大小不同的蛋白质分开，这一方法简称SDS-PAGE。第二步，将电泳分离的病毒蛋白质转印到硝酸纤维膜上（电转印法）。第三步，将硝酸纤维膜浸于待检血清中，若血清含HIV抗体，即与膜上的相应病毒蛋白抗原结合，洗涤去除未结合抗体，再加酶标记的二抗，最后加底物显色。结果表明，待检血清中有针对HIV120kD、41kD和24kD蛋白的相应抗体。