B杂交瘤细胞产生特异性抗体

细胞杂交是20世纪60年代建立的一种新技术。细胞杂交的含义包括细胞的自家融合或在诱导物的作用下，使种内或种间的细胞融合成一个新的细胞（杂交细胞）。融合后的细胞具有双亲的细胞核，经有丝分裂成为两个单核子细胞，其核内含有双亲细胞的染色体。
在免疫学领域内，利用瘤细胞(如小鼠骨髓瘤细胞、胸腺淋巴瘤细胞)在体外可大量增殖的特性，与B细胞或T细胞融合成为B或T杂交细胞系 (或称B细胞或T细胞杂交瘤)。它们既具有瘤细胞易于在体外增殖的特性，又具有B细胞或T细胞的免疫学性质。
利用B杂交瘤细胞技术，可以获得单克隆的抗体。方法是先培养小鼠浆细胞瘤，并筛选出缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)的细胞系，使之在培养基中大量增殖。用纯抗原或复杂抗原免疫小鼠后，取其脾分离淋巴细胞，与上述培养的小鼠浆细胞混合后，加聚乙烯二醇作为融合剂，使两类细胞融合，融合后加入筛选培养基 (培养基中加次黄嘌呤、氨基喋呤及胸腺嘧啶核苷) 中培养。只有杂交瘤细胞可以生长，其他细胞均死亡。如果小鼠瘤细胞与产生所需抗体的细胞融合，则此种杂交瘤就具有瘤细胞在培养基中生长迅速，又具有B细胞分泌特异性抗体的特性，因此在培养基中出现大量抗体，并能在体外连续培养。将上述杂交瘤单个细胞培养，形成单克隆，就可以利用培养方法，取得源源不断的很纯的单克隆抗体。这种抗体的结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的，而且在培养过程中只要没有突变，不同时间所分泌的抗体都保持同样的结构和功能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。它在免疫学方面应用很广泛，例如产生单克隆免疫诊断抗体，应用细胞融合方法产生的每一个淋巴细胞杂交瘤，只能分泌出对一个抗原决定簇的抗体。用一种细菌免疫动物后，作细胞融合，可以得到许多杂交瘤单克隆抗体，分别对不同的抗原决定簇起反应。用细菌作抗原产生的杂交瘤，可以分别产生对种、型、亚型三种不同的纯抗体。以这种抗体作为鉴别细菌的种、型或亚型，敏感度高，特异性强，不会发生交叉反应，还可发现过去用动物免疫法所不能查出的抗原决定簇。因为抗原(大分子蛋白、病毒、细菌或寄生虫甚至人的细胞如淋巴细胞) 表面是由许多抗原决定簇组合的，用上述抗原免疫动物，产生的抗血清是多种抗体的混合物，达不到上述的鉴定目的。