药敏试验应注意的几个问题

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一、试验菌

应采用新分离菌株，一般使用经培养6h或18h的肉汤培养物，用肉汤液或生理盐水作1∶1000或1∶10稀释。具体的接种剂量及方法，应视实际情况而定。

二、培养基

应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度合适(约5～6mm)，不可太薄，一般90mm直径的平皿，倾注培养基18～20ml为宜。当有些药物具有抗代谢作用时，培养基内不能含有该代谢物。如进行磺胺类药物的抑菌试验，培养基内不能有对氨基苯甲酸或叶酸。

三、抗菌药物

药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果。需要精确配制。

四、培养时间

一般的培养温度和时间为37℃8～18h。但是，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2～4h，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌生长，而得到较大的抑菌圈。

五、对照试验

为准确判断试验结果，实验中必须同时进行各种对照试验。

试验菌对照：在无药情况下，应能在培养基内正常生长。

稀释液对照：配制抗菌药物所用的稀释溶液应无抗菌作用。

抗菌药对照：药物原液应具有明显的抑菌作用。