细菌的接种

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一、平板划线法

将检查材料涂布于琼脂平板上，使细菌分散，生长后现菌落。常用连续划线法或方格划线法。

划线时右手执接种环，将环直立于酒精灯外焰烧红，再将环横转，在火焰上转动来回将柄部下端来回烧3次，冷却，蘸取要接种的材料。用左手掌握平皿，无名指与小指在平皿底下，食指在平皿盖上大拇指及中指将平皿盖掀开一口，右手的接种环将材料涂于培养基边缘，成为基线。

连续划线是从基线开始向左右两侧划开，并连续向下移动，连续划成若干条曲线(图5-1)。

图5-1 平板划线法

方格划线是将接种环与基线接触后，并与基线平行划出若干条平行线，然后再划出若干条与基线垂直的线，使整个平板划线呈方格(图5-1)。接种后将平皿盖向下置温箱中培养。

二、斜面接种法

左手持培养基管和样品管，右手持灭菌接种环(火焰灭菌)，待冷后，取下棉塞夹持于右手小指与手掌间，用接种环沾取样品少许，插入接种管自下而上在琼脂斜面上连续划线。划线完毕，管口通过火焰，塞上棉塞，竖立，置温箱培养。

三、穿刺接种法

用灭菌接种针蘸取样品少许，由培养基表面中央直刺至底部(勿穿透)，再由原穿刺线抽出，若培养基为高层斜面，穿刺后立即在斜面上作划线接种。

本法常用于接种明胶，半固体，三糖铁培养基等。

四、倾注平板法

1．取适当稀释的样品1m1，置于无菌平皿中。

2．倾入已溶化并冷至50℃左右的琼脂培养基约15ml，混匀好，待凝固后，倒置平皿，置温箱培养。

本法多用于饮水、乳、尿液及活菌苗等标本的细菌计数。

五、液体培养基接种法

左手持培养基管和样品管，右手持灭菌接种环，拔下棉塞夹持于右手小指和手掌间，接种环沾取样品少许，插入接种管，在试管内壁与液面接触处轻轻涂擦使样品乳化。接种完毕，塞上棉塞，竖立，置温箱培养。

六、动物接种法

见动物实验部分。