大豆品种的种子蛋白质电泳鉴定法

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1．一般蛋白质电泳法

(1)配制缓冲液 配制0．1N醋酸缓冲液(pH4．5)。

(2)样品提取和电泳 每0．1g种子样品加入1ml醋酸缓冲液，将种子磨碎，在4℃下浸提1小时，然后在27600×g离心15分钟，吸取0．1ml上清液加蔗糖。用7%凝胶柱或板电泳，然后用Tris-glycine(25mM Tris，pH8．5)电极缓冲液，4mA／管进行电泳跑1．5小时。

(3)染色 用0．2%氨基蓝黑(amaline blue black)溶解在醋酸中，进行染色，然后浸入7%醋酸液中脱色。

(4)品种鉴定 按不同品种蛋白质谱带的不同，区分不同品种。

【参考文献】：

〔1〕西北农业大学编(1978)，作物育种学，P531－542，农业出版社。

〔2〕王金陵编(1957)，大豆品种纯度检验，黑龙江省农业厅种子处印。

〔3〕陶嘉龄(1981)，种子生理和种子标准，P15－20，浙江农业大学农学系种子教研组整理印刷。

〔4〕浙江省农科院育种栽培所着(1964)，农作物田间试验记载项目及试行标准，PP74－79，《浙江农业科学》编辑部。

〔5〕B．J．Cardy et al(1984)．Identification of Soybean Cultivars using isoenzyme electrophoresis，Seed Sci．& Technol，12：943－954。