(4)烟叶和土壤中残留量检测方法

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中国农业科学院烟草研究所 徐光军 曹爱华 李义强 刘保安

样本用甲醇提取，液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法(ECD)检测。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

超声波提取器

旋转蒸发器

层析柱

2．主要试剂

甲醇、二氯甲烷、石油醚、丙酮、氯化钠、无水硫酸钠

啶虫脒标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取6g干烟叶(鲜烟叶20g，土壤20g)置于250mL具塞三角瓶中，加入100mL甲醇，浸泡过夜，超声波提取30min，过滤。滤渣用50mL、30mL甲醇洗涤。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

合并滤液于500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠溶液和100mL石油醚，振摇1min，弃去石油醚相。水相用50mL、50mL、30mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，用装有无水硫酸钠的漏斗过滤脱水，用旋转蒸发器浓缩至近干。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中依次填充2cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠，用20mL丙酮／石油醚(20∶80，V／V)溶液预淋。将上述残余物用10mL丙酮／石油醚(20∶80，V／V)溶解并转入柱顶，用60mL丙酮／石油醚(20∶80，V／V)淋洗，弃去。再用100mL丙酮／石油醚(50∶50，V／V)溶液洗脱。收集洗脱液，浓缩至近干，用丙酮／石油醚(20∶80，V／V)定容，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 OV-101，30m×0．53mm

检测温度 柱温240℃；进样口270℃；检测器270℃

载气 高纯氮 65mL／min

保留时间 1．6min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 3．2×10^－13g。

最低检测浓度 烟叶0．005mg／kg，土壤0．002mg／kg。

回收率 烟叶中添加啶虫脒0．3～3．0mg／kg时，平均回收率为86．2%～93．1%；土壤中添加啶虫脒0．1～1．0mg／kg时，平均回收率为83．3%～87．4%，见表1-2-7。

相对标准偏差 2．3%～11．5%，见表1-2-7。

表1-2-7 烟叶和土壤中啶虫脒添加回收率及相对标准偏差实验结果