(3)油菜籽、植株和土壤中残留量检测方法

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浙江省农业科学院农产品质量标准研究所 李康 李振 吴珉 胡秀卿

样本中的精噁唑禾草灵及其代谢物(AEF088406)经盐酸水解成苯并噁唑酮(AEF054014)用索氏提取，乙醚萃取，SPE-C₁₈柱层析净化后，液相色谱法(DAD)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 二极管阵列检测器(DAD)

台式恒温振荡器(±2℃)

旋转蒸发器

数显恒温水浴锅

循环水真空泵

SPE-C₁₈柱 500mg／6mL

2．主要试剂

甲醇(HPLC)、乙腈、甲醇、乙醚、环己烷、浓盐酸、无水硫酸钠

重蒸水 石英亚沸蒸馏器蒸出，过50m滤膜

精噁唑禾草灵标准品、苯并噁唑酮标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取20g样本(茎叶切碎，土壤过粗筛，菜籽搅碎)，置于索氏提取器中，加入90mL乙腈和10mL6mol／L盐酸溶液，在95℃水浴上回流6h。

3．2 液-液分配

将提取液移入500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠溶液，用1mol／L的氢氧化钠调节pH至中性。用100mL环己烷分两次洗涤水相，弃去有机相。再用100mL乙醚分两次萃取。合并乙醚相，经无水硫酸钠层滤入250mL圆底烧瓶中，浓缩至近干。

3．3 SPE-C₁₈柱净化

取20mL重蒸水分3次溶解蒸残物并洗涤圆底烧瓶，转入SPE-C₁₈柱上，用10mL重蒸水淋洗，弃去。再用5mL甲醇／水(3∶2，V／V)洗脱，收集洗脱液，待测。

3．4 液相色谱测定

检测器 DAD

波长 234nm，参比360nm

色谱柱 Hypersil ODS柱(带预柱)4．0mm×25cm

流动相 甲醇／水(3∶2，V／V)

流速 0．5mL／min

柱温 40℃

进样量 20μL

保留时间 8．5min(AEF054014)

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

精噁唑禾草灵母体(AEF046360)与苯并噁唑酮(AEF054014)分子量比为2．13。其代谢物AEF088406与苯并噁唑酮(AEF054014)分子量比为1．97。

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－9g。

最低检测浓度 菜籽、茎叶0．025mg／kg，土壤0．013mg／kg。

回收率 菜籽、茎叶和土壤中添加精噁唑禾草灵0．1～0．5mg／kg时，平均回收率分别为75．0%～97．9%、94．5%～100．7%和79．7%～94．3%；添加代谢物0．1～0．5mg／kg时，平均回收率分别为87．9%～90．7%、95．3%～108．7%和87．9%～90．7%。详见表3-17-5。

相对标准偏差 2．1%～18．5%，见表3-17-5。

表3-17-5 油菜籽、茎叶和土壤中精噁唑禾草灵及其代谢物(AEF088406)添加回收率和相对标准偏差实验结果