(2)棉籽、植株和土壤中残留量检测方法

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河北省农林科学院遗传生理研究所 张少军 王莉 陈勇达 钱训 默涛

棉籽用石油醚提取、棉株和土壤用丙酮／水提取，石油醚液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，用气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

组织捣碎机

超声波清洗器

旋转蒸发器

层析柱

2．主要试剂

丙酮、石油醚(60～90℃)、乙腈、乙醚、助滤剂(celite545)、氯化钠、无水硫酸钠

弗罗里硅土 130℃处理4h，5%水减活

甲基毒死蜱标准品

3．检测步骤

3．1 提取与液-液分配

3．1．1 棉株、土壤

称取10g棉株样本(土壤20g)，加60mL丙酮／水(3∶2，V／V)，浸泡4h，超声波振荡提取10min，抽滤。用15mL×3丙酮／水洗残渣。合并滤液于分液漏斗中，加60mL10%氯化钠溶液，用20mL×3石油醚萃取。合并石油醚，用旋转蒸发器(≤45℃)浓缩至干，用10mL石油醚溶解残留物，待柱层析净化。

3．1．2 棉籽

称取10g样本，加60mL石油醚，浸泡4h，超声波振荡提取10min，抽滤。用15mL×3石油醚洗残渣。合并滤液于分液漏斗中，用30mL、20mL乙腈萃取，弃去石油醚。在合并的乙腈相中加入100mL5%氯化钠溶液，用30mL×2石油醚萃取。合并石油醚，蒸干，用10mL石油醚溶解残留物，待柱层析净化。

3．2 柱层析净化

在层析柱中，填装3g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠。用15mL石油醚预淋。转移残留物到柱上，用20mL石油醚淋洗并弃去，再用40mL石油醚／乙醚(3∶1，V／V)洗脱。收集洗脱液，蒸干，用石油醚定容至5mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 AT．OV-1，30m×0．32mm×0．25μm

检测温度 进样口270℃；检测器280℃；柱温70℃，30℃／min，230℃，8min，20℃／min，260℃，10min

载气 高纯氮1mL／min，尾吹气59mL／min

进样体积 1μL

保留时间 10．6min

4．结果计算

外标(峰面积或峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 7．0×10^－12g。

最低检测浓度 棉株及棉籽中0．006mg／kg，土壤中0．003mg／kg。

回收率 棉株、棉籽和土壤中添加甲基毒死蜱0．01～0．10mg／kg时，平均回收率为92．2%～98．0%，见表1-9-2。

相对标准偏差 1．7%～5．8%，见表1-9-2。

表1-9-2 棉籽、棉株和土壤中甲基毒死蜱添加回收率及相对标准偏差实验结果