(1)柑橘和土壤中残留量检测方法(方法一)

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湖南农业大学农业环境保护研究所

郭正元 郑丽英 刘毅华 赵卫星 杨仁斌 龚道新

样本用甲醇提取，石油醚液-液分配，中性氧化铝／弗罗里硅土柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

组织捣碎机

旋转蒸发器

水浴恒温振荡器

层析柱 Φ15mm×300mm

2．主要试剂

甲醇(色谱纯)、丙酮、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、氯化钠

弗罗里硅土 650℃处理4h，加5%水减活

唑螨酯标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

准确称取20g土壤样本置于250mL具塞三角瓶中，加60mL甲醇，振荡提取1h，抽滤。用少量甲醇洗涤残渣，合并滤液。

3．1．2 橘肉

准确称取50g橘肉，匀浆，置于250mL三角瓶中，加入60mL甲醇，振荡提取40min，抽滤。

3．1．3 橘皮

称取20g切碎的橘皮置于滤纸筒中，装入索氏提取器中，加入100mL石油醚／丙酮(1∶1，V／V)溶液，于75℃水浴锅上回流提取6h。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 土壤

将合并后的滤液转入加有80mL10%氯化钠溶液的500mL分液漏斗中，用30mL、20mL、20mL石油醚萃取。合并石油醚相，用20mL含0．01mol／L氢氧化钠的5%氯化钠水溶液洗涤。石油醚经无水硫酸钠脱水后，浓缩至1～2mL。

3．2．1．2 橘肉

将滤液转移至加有150mL10%氯化钠溶液的500mL分液漏斗中，用60mL、30mL石油醚萃取。合并石油醚相，用50mL含0．01mol／L氢氧化钠的5%氯化钠水溶液洗涤。石油醚经无水硫酸钠脱水后，浓缩到1～2mL。

3．2．1．3 橘皮

将提取液转入500mL分液漏斗中，加入100mL10%氯化钠溶液，分出石油醚层。水相用30mL、20mL石油醚萃取。合并石油醚相，用100mL含有0．01mol／L氢氧化钠的5%氯化钠溶液洗涤。收集石油醚相，经无水硫酸钠脱水后，浓缩到1mL左右。

3．2．2 柱层析净化

层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g中性氧化铝、4g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠，用25mL石油醚／乙酸乙酯(9∶1，V／V)预淋。将上述浓缩液移入柱中，用50mL石油醚／乙酸乙酯(9∶1，V／V)洗脱。收集全部冼脱液，用氮气吹干，用甲醇定容至10mL，待测。

3．3 高效液相色谱法测定

检测器 UV

波长 225nm

色谱柱 125mm×4．0mm，ODS不锈钢柱

流动相 甲醇／水(80∶20，V／V)

流速 1mL／min

柱温 35℃

进样量 20μL

保留时间 5．0min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．2×10^－9g。

最低检测浓度 橘肉0．006mg／kg，橘皮0．015mg／kg，土壤0．015mg／kg。

回收率 土壤、橘肉和橘皮中添加唑螨酯0．05～2．00mg／kg时，平均回收率分别为94．1%～99．9%、81．6%～93．8%和89．1%～96．3%。见表1-19-1。

相对标准偏差 1．1%～5．1%，见表1-19-1。

表1-19-1 土壤、橘肉和橘皮中唑螨酯添加回收率及相对标准偏差实验结果