糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法(方法二)

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北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 陈家梅 戴荣彩 夏福利 王漫琳

样品用二氯甲烷提取，中性氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

振荡器

旋转蒸发器

酸度计

高速离心机

超声清洗器

层析柱 Φ6mm×220mm

2．主要试剂

丙酮、正己烷、二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、乙腈、磷酸、中性氧化铝(100～200目)、碳酸钙

四唑嘧磺隆标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 田水

取100mL水样，加入5mL饱和氯化钠溶液，用2N磷酸调节pH3，经50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干。用乙腈溶解并定容至1mL，测定。

3．1．2 糙米、稻壳、稻草、土壤

称取糙米10g(稻壳5g、稻草5g、土壤20g)于250mL三角瓶中，加入20mL水、80mL丙酮，振荡提取40min，抽滤。用30mL丙酮洗涤滤渣，合并滤液用旋转蒸发器(40℃)蒸去丙酮，待净化。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将浓缩液转入250mL分液漏斗，加80mL2%氯化钠溶液，用50mL×2正己烷洗涤，弃去正己烷相。水相用2N磷酸调节pH3，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取。

土壤样本的二氯甲烷萃取液合并后，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干，用乙腈溶解并定容至1mL，待测。

其他样本的二氯甲烷萃取液合并后，用50mL、40mL和30mL0．1mol／L碳酸钠反萃取。合并水相，用4N磷酸调节pH3，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干。

3．3 柱层析净化

层析柱填装1g中性氧化铝。将糙米、稻壳、稻草的浓缩液转入层析柱中，用5mL×2二氯甲烷／乙酸乙酯(1∶1，V／V)和10mL二氯甲烷／丙酮(1∶1，V／V)充分洗涤浓缩瓶后转入层析柱，弃去柱底流出液。用20mL二氯甲烷／甲醇(3∶2，V／V)洗脱。收集洗脱液，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干，用乙腈溶解并定容至1mL。

3．4 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 245nm

色谱柱 ODS 4．6mm×250mm×5μm

柱温 40℃

流动相 乙腈／水／磷酸(55∶45∶0．5，V／V／V)

流速 1mL／min

进样量 20“L

保留时间 6．6min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．6×10^－11g。

最低检测浓度 糙米8×10^－5mg／kg，稻壳、稻草1．6×10^－4mg／kg，土壤4×10^－5mg／kg，水田8×10^－6mg／L。

回收率 糙米、稻草、稻壳、土壤、田水中添加四唑嘧磺隆0．05～1．0mg／kg时，平均回收率为82．4%～105．0%。见表3-6-2。

相对标准偏差 1．1%～14．1%，见表36-6-2。

表3-6-2 糙米、稻壳、稻草、土壤和稻田水中四唑嘧磺隆添加回收率及相对标准偏差实验结果