稻谷、植株、土壤和田水中残留量检测方法(方法一)

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上海市农业科学院植物保护研究所 王伟民 盛亚红

样本用丙酮或二氯甲烷提取，SPE-Florisil(弗罗里硅土)柱净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

高速组织捣碎机

振荡器

固相萃取器

旋转蒸发器

2．主要试剂

乙腈(HPLC)、丙酮(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、正己烷(重蒸)、甲醇、磷酸、碳酸钠、氯化钠

SPE-Florisil柱 500mg

四唑嘧磺隆标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 稻谷、稻秆和土壤

称取10g样本置于250mL具塞三角烧瓶中，加入100mL丙酮和20mL去离子水，振荡提取1h，抽滤。滤渣用50mL丙酮分3次洗涤、过滤，合并滤液。

3．1．2 田水

量取100mL田水样于250mL分液漏斗中，加入2mL1．3mol／L磷酸，用50mL×2二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相。用旋转蒸发器(40℃)浓缩至2ml，待柱净化。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

稻谷、稻秆、土壤提取液用旋转蒸发器(35℃)除去丙酮，残存的水相转入500mL分液漏斗中，加入5mL饱和氯化钠溶液和80mL蒸馏水，用100mL正己烷分两次振摇洗涤，弃去正己烷相。在水相中加入2ml 1．3mol／L磷酸，50mL×2二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相。用50mL、30mL0．1mol／L碳酸钠溶液反萃取，弃去二氯甲烷相。合并水相，加入约3mL1．3mol／L磷酸，调节pH为3，用100mL二氯甲烷分两次萃取。合并二氯甲烷相用旋转蒸发器(40℃)浓缩至2mL。

3．2．2 柱净化

将浓缩液转入500mg SPE-Florisil柱上，用10mL二氯甲烷／乙酸乙酯(1∶1，V／V)分两次洗圆底烧瓶，并转入小柱中，流出液弃去。用40mL二氯甲烷／甲醇(1∶3，V／V)洗脱。收集洗脱液用旋转蒸发器(40℃)浓缩至近干，氮气吹干，用乙腈溶解、定容。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 245nm

色谱柱 VP-ODS，4．6mm×150mm，加预柱

柱温 30℃

流动相 乙腈／水／磷酸(55∶45∶0．5，V／V／V)

流速 1mL／min

进样量 15μL

保留时间 4．9min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 3．0×10^－10g。

最低检测浓度 稻谷0．02mg／kg，植株0．02mg／kg，土壤0．004mg／kg，田水0．002mg／L。

回收率 稻谷、稻秆中添加四唑嘧磺隆0．05～1．00mg／kg时，平均回收率为83．3%～106．0%；田水、土壤中添加四唑嘧磺隆0．01～0．25mg／kg时，平均回收率为76．0%～90．8%。见表3-6-1。

相对标准偏差 2．6%～16．4%，见表3-6-1。

表3-6-1 稻谷、稻秆、田水和土壤中四唑嘧磺隆添加回收率及相对标准偏差实验结果