甘蓝和土壤中残留量检测方法(方法二)

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天津市农业科学院中心实验室 郭永泽 张玉婷 刘凤来 宋淑荣 石守良

样本用甲醇提取，SPE-C₁₈柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

样本粉碎机

空气浴振荡器

旋转蒸发器

2．主要试剂

甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚(重蒸)、氯化钠、盐酸、无水硫酸钠

SPE－C₁₈

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取20g样本于三角瓶中，加100mL甲醇浸泡1h，振荡提取30min，过滤，滤渣用80mL甲醇再振荡30min，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将滤液转移入分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠水溶液和100mL石油醚，振摇，静置分层。下层水相放入另一分液漏斗中，石油醚相用50mL5%氯化钠水溶液反萃取1次，弃去石油醚相。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸，摇匀，再分别用40mL、40mL、20mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，用无水硫酸钠脱水，过滤并浓缩至近干。

3．2．2 柱净化

取SPE-C₁₈柱，用10mL甲醇预淋，至干，再用去离子水预淋，至干。样本蒸残物用10mL石油醚／乙酸乙酯(8．5∶1．5，V／V)分3次转移至柱中，弃去淋出液。用石油醚／乙酸乙酯(3∶7，V／V)洗脱，收集10mL洗脱液，浓缩至近干，用甲醇定容至4mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 270nm

色谱柱 Diamosil(TM)C₁₈，250mm×4．6mm，5μm

柱温 30℃

流动相 甲醇／水(50∶50，V／V)

流速 1mL／min

进样量 10μL

保留时间 5．55min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．1×10^－9g。

最低检测浓度 甘蓝和土壤均为0．023mg／kg。

回收率 甘蓝和土壤中添加吡虫啉0．1～5．0mg／kg时，平均回收率分别为85．4%～90．2%和83．8%～92．7%，见表1-21-4。

相对标准偏差 3．6%～5．5%，见表1-21-4。

表1-21-4 甘蓝和土壤中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果