棉籽、植株和土壤中残留量检测方法(方法三)

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中国农业科学院植物保护研究所 郑永权 董丰收 姚建仁

样本用甲醇提取，SPE-C₁₈柱净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

回旋式振荡器

超声波清洗器

高速分散机

旋转蒸发器

恒温水浴锅(±2℃)

2．主要试剂

乙腈(色谱纯)、甲醇、石油醚(60～90℃)、二氯甲烷、乙酸乙酯、浓盐酸、氯化钠、无水硫酸钠

SPE-C₁₈柱 500mg／5mL

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取20g过40目筛的风干土壤(切碎的植株10g，脱绒后粉碎的棉籽10g)，置于500mL平底三角烧瓶，加120mL甲醇／水(3∶1，V／V)，浸泡1h(植株样本，另需组织捣碎机捣碎2min，并用30mL甲醇／水冲洗容器)，振荡30min，过滤。滤渣再加80mL甲醇振荡30min，过滤。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

合并滤液于500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠水溶液和100mL石油醚，振摇，静止分层。将石油醚相用5%氯化钠50mL反萃取1次，弃去石油醚相。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸，摇匀，用50mL、50mL、25mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，用无水硫酸钠脱水滤入500mL平底烧瓶中，用旋转蒸发器减压浓缩至近干，用氮气吹干。

3．2．2 柱净化

将SPE-C₁₈柱，依次用10mL甲醇和去离子水预淋并至干。用10mL石油醚／乙酸乙酯混合液(85∶15，V／V)分3次将上述残余物转入柱上，淋出液弃去。用石油醚／乙酸乙酯混合液(30∶70，V／V)洗脱，收集10mL洗脱液，浓缩至干，用甲醇定容至10mL，侍测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 270nm

色谱柱 ODS Hypersil，250mm×4．6mm×5μm

流动相 乙腈／水(40∶60，V／V)

流速 1．0mL／min

进样量 20μL

保留时间 3．97min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－9g。

最低检测浓度 棉籽和植株均为0．05mg／kg，土壤0．01mg／kg。

回收率 土壤、植株和棉籽中添加吡虫啉0．05～1．00mg／kg时，平均回收率分别为87．4%～91．3%、79．9%～85．0%和85．7%～90．6%。见表1-21-10。

相对标准偏差 2．2%～7．0%，见表1-21-10。

表1-21-10 土壤、植株和棉籽中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果