棉籽、植株和土壤中残留量检测方法(方法一)

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山东省农业科学院植物保护研究所 于建垒 宋国春

棉叶、棉籽用二氯甲烷提取，弗罗里硅土和中性氧化铝柱层析净化；土壤用二氯甲烷提取，不需净化。液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

超声波清洗器

真空旋转蒸发器

恒温水浴锅

小型真空泵

层析柱 Φ2．5mm×25cm

2．主要试剂

甲醇(色谱纯)、二氯甲烷、乙二醇、无水硫酸钠、弗罗里硅土、中性氧化铝、重蒸水

福美双标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

称20g样本于250mL具塞三角瓶中，加80mL、60mL二氯甲烷，浸泡20min，超声波提取两次，每次15min。残渣用60mL二氯甲烷分3次洗涤。合并二氯甲烷滤液，用旋转蒸发器(55℃)减压浓缩至刚干。用甲醇定容至10mL，经0．45μm微孔滤膜过滤，待测。

3．1．2 棉叶、棉籽

称取5g样本，组织捣碎。加50mL二氯甲烷，超声波提取15min，经无水硫酸钠过滤。滤渣用150mL二氯甲烷分3次洗涤。合并二氯甲烷滤液，加入2mL乙二醇，减压浓缩(55℃)至2～3mL，待净化。

3．2 净化

在层析柱中，依次装入2cm无水硫酸钠、10g弗罗里硅土、5g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠。用50mL二氯甲烷预淋。倒入待净化样本，用二氯甲烷洗脱，收集洗脱液150mL，用旋转蒸发器(55℃)减压浓缩至2mL，用甲醇定容至5mL，经0．45μm滤膜过滤，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 255nm

流动相 甲醇／水(1∶1，V／V)

流速 1mL／min

进样量 20μL

保留时间 10min左右

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 5×10^－10g。

最低检测浓度 棉籽、棉叶为0．05mg／kg，土壤0．025mg／kg。

回收率 棉叶、棉籽和土壤中添加福美双0．05～1．25mg／kg时，平均回收率分别为78．3%～84．3%、77．0%～81．6%和77．5%～93．8%。见表2-31-1。

相对标准偏差 2．3%～4．0%，见表2-31-1。

表2-31-1 棉叶、棉籽和土壤中福美双添加回收率及相对标准偏差实验结果