棉籽、植株和土壤中残留量检测方法

---

天津市农业科学院中心实验室 郭永泽 张玉婷 刘凤来 宋淑荣 石守良

棉籽用丙酮提取，植株与土壤用丙酮／甲醇提取，弗罗里硅土柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

旋转蒸发器

空气浴振荡器

样本粉碎机

2．主要试剂

丙酮(重蒸)、甲醇(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)

弗罗里硅土(Florisil) 80～100目，130℃烘5h，加5%水减活

颗粒活性炭 盐酸洗，煮沸1h，冷却后洗至中性

水 重蒸馏两次，0．45μm滤膜过滤

萎锈灵标准品、福美双标准品

3．检测步骤

3．1 土壤

3．1．1 提取

称取20g样本于三角瓶中，加50mL丙酮／甲醇(1∶1，V／V)，振荡提取2h。用装有无水硫酸钠的漏斗过滤。滤渣用150mL丙酮／甲醇(1∶1，V／V)洗涤3次，合并滤液浓缩至近干。用甲醇／丙酮(10∶1，V／V)定容至4mL，待测。

3．2 植株

3．2．1 提取

称取20g切碎的样本于三角瓶中，加75mL丙酮，振荡提取2h，过滤。滤渣用50mL二氯甲烷分3次洗涤。合并滤液转移到分液漏斗中，加30mL3%氯化钠溶液，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，浓缩。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土、2g活性炭、1g助滤剂和2cm无水硫酸钠。用150mL二氯甲烷洗脱，收集全部洗脱液，浓缩近干，用甲醇／丙酮(10／1，V／V)溶液定容至4mL，待测。

3．3 棉籽

3．3．1 提取

称取20g粉碎样本于三角瓶中，加50mL丙酮／甲醇(1∶1，V／V)，振荡提取2h，用装有30g无水硫酸钠的漏斗过滤。滤渣用150mL丙酮／甲醇(1∶1，V／V)溶液洗涤3次。合并滤液，浓缩。

3．3．2 净化

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土、1g活性炭和2cm无水硫酸钠。将浓缩液转移到柱中，用150mL丙酮／甲醇(1∶1，V／V)溶液淋洗并收集洗脱液，浓缩至近干，用甲醇／丙酮(10∶1，V／V)溶液定容至4mL，待测。

3．4 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 254nm

色谱柱 KromasilC₁₈，4．6mm×250mm，5μm

柱温 30℃

流动相 甲醇／水(60∶40，V／V)

流速 1mL／min

保留时间 萎锈灵6．80min，福美双5．36min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 萎锈灵4．6×10^－10g，福美双7．9×10^－10g。

最低检测浓度 萎锈灵0．036mg／kg，福美双0．062mg／kg。

回收率 棉花植株、土壤和棉籽中添加萎锈灵和福美双0．05～5．00mg／kg时，平均回收率分别为萎锈灵86．0%～93．3%，福美双83．3%～90．8%。见表2-3-1。

相对标准偏差 0．9%～5．7%，见表2-3-1。

表2-3-1 棉花植株、土壤和棉籽中萎锈灵、福美双添加回收率及相对标准偏差实验结果