小麦籽粒、植株和土壤中残留量检测方法

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中国农业大学理学院 潘灿平

样本用丙酮提取，小麦植株经弗罗里硅土混合柱层析净化，小麦籽粒经硅胶混合层析柱净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

台式恒温振荡器(±2℃)

匀浆机

真空旋转蒸发器

恒温水浴锅(±2℃)

2．主要试剂

乙腈(色谱纯或重蒸)、丙酮、二氯甲烷、无水硫酸钠、氯化钠、弗罗里硅土、硅胶G

苯哒嗪丙酯标准品

3．检测步骤

3．1 提取及净化

3．1．1 土壤

取20g样本置于100mL三角瓶中，加丙酮至刚好没过固体，静置平衡30min。加20mL水，振荡20min，抽滤。用丙酮洗涤三角瓶及滤渣2～3次，合并滤液，浓缩至20mL左右。

将浓缩液置于250mL分液漏斗中，加入4g氯化钠，分别用30mL、30mL、20mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相经装有无水硫酸钠的漏斗过滤脱水，减压浓缩至近干，用吸耳球吹干。洗涤瓶壁3次，用乙腈定容至1．0mL。

3．1．2 小麦籽粒

准确称取10．0g粉碎小麦籽粒和10g硅胶，置于研钵中充分研磨混合成流动状态。将混合物装柱(柱子下端用棉花堵住)，上下两端装入2cm无水硫酸钠。用少量丙酮洗涤研钵并加入柱内，用80mL丙酮淋洗并洗脱。收集洗脱液于圆底烧瓶中，减压浓缩至近干，用氮气吹干。用少量乙腈洗涤瓶壁3次，转移至刻度试管中。用氮气吹至近干并用乙腈定容至1．0mL，待测。

3．1．3 茎秆

准确称取5．0g粉碎茎秆粉和10．0g弗罗里硅土，置于研钵中充分研磨混合成流动状态。将混合物装柱(柱子下端用棉花堵住)，上下两端装入2cm无水硫酸钠。用少量丙酮洗涤研钵并加入柱内，用80mL丙酮／二氯甲烷(1∶1，V／V)淋洗并洗脱。收集洗脱液于圆底烧瓶中，减压浓缩至近干，用氮气吹干。用少量乙腈洗涤瓶壁3次，转移至刻度试管中。用氮气吹至近干并用乙腈定容至1．0mL，待测。

3．2 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 272nm

色谱柱 SBC₁₈柱，150×4．6mmID，5μm

柱温 室温

流动相 乙腈／水(45∶55，V／V)

流速 1mL／min

进样体积 20μL

保留时间 5．3min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2．0×10^－8g。

最低检测浓度 小麦籽粒、茎秆、土壤0．05mg／kg。

回收率 小麦籽粒、茎秆和土壤中添加苯哒嗪丙酯0．05～5．0mg／kg时，平均回收率分别为94．3%～98．0%、94．7%～103．0%和88．7%～92．7%。见表3-7-1。

相对标准偏差 4．3%～16．4%，见表3-7-1。

表3-7-1 土壤、小麦籽粒、茎秆中苯哒嗪丙酯添加回收率及相对标准偏差实验结果