脑脊液非特异性酯酶反应-醋酸萘酯酶法cerebrospinal fluid anephthy acetate esterase,ANAE method

CSF细胞染色法之一。其步骤：
❶置片于甲醛蒸汽下固定5min;
❷流水轻洗5min，空气中待干；
❸与α-醋酸萘酯为底质(❶+
❷)一起25℃下孵育20min;
❹流水轻洗5min，空气中干燥；
❺Harris苏木素染色8min;
❻流水轻洗15min后，空气中待干；
❼加拿大胶封固。底质α-醋酸萘酯的制备：亚硝酸纳0.25ml，副品红液0.25ml及0.2M磷酸缓冲液(pH7.4)25ml混合。α-醋酸萘酯50mg溶于纯丙酮1ml。单核样细胞内含非特异性酯酶(ANAE)能将孵育液内α-醋酸萘酯水解，产生α-萘酯和醋酸离子，然后α-萘酚与六偶氮副品红偶联，在胞浆中酯酶存在部位，生成不溶性棕红色颗粒。应用酸性孵育液(pH5.8～6.2)Muller(1975)则可重点检测T淋巴细胞。已有学者用此法证实CSF中的T细胞。临床上通过CSF中T细胞的升高及其与外周血T细胞的对比，可诊断散发性脑炎、无菌性脑膜炎、结核性脑膜炎、亚急性硬化性全脑炎及脑肿瘤等。