释义 |
聚合酶链式反应polymerase chain reaction,PCR一种扩增基因组片段的技术。1985年开始建立。利用一对引物介导,可在体外酶促下,使特异的DNA片段(靶顺序)在数小时内扩增成百万倍。反应的主要程序是,在PCR液中,通过加热至95℃左右,使模板DNA变性成单链DNA,到降温至52℃左右时。过量的引物优先和与之互补的靶DNA顺序结合(退火),然后,在聚合酶的催化下,在72℃左右时,引物沿靶DNA的3′端向5′端延伸,经过一个反应周期,使靶DNA片段加倍,再经n个周期,靶DNA顺序便增加2n倍。与传统的分子杂交分析法相比,具有快速、敏感、产率高、操作方便和易自动化等特点。近年来,在原基础上还发展了直接分析法、产物酶解分析法、连接分析法和化学裂解法等多种方法。对基因的检测、分离、顺序分析以及基因表达、定位诱变等研究提供了方便。同时,在基因定位、基因突变、性别鉴定,特别是在癌变和遗传病的产前基因诊断等方面已得到广泛应用。 |