紫外光谱法ultraviolet spectroscopy

利用有机化合物吸收紫外光的特征，对有机农药进行定性、定量或结构分析的方法。
原理 有些有机农药分子能吸收波长为200～400纳米的紫外光，使分子中的成键、非键和反键电子由基态跃迁到激发态。电子跃迁时所吸收的能量与化合物的结构有关。
农药分子对光的吸收程度随波长的改变而发生变化。以紫外光的波长为横坐标，农药溶液对紫外光的吸光度、百分吸光值，摩尔吸光系数ε或它的对数logε为纵坐标作图，可以获得此农药的紫外吸收光谱。不同的有机农药具有不同的紫外吸收光谱(图1)。

图1 灭螨猛紫外光谱图
(据C.A.Anderson)

仪器结构 一般的紫外光谱仪（包括可见光区）由光源、单色器、检测器三个部分组成(图2)。在紫

图2 典型的紫外光谱仪示意图
（据陈德恒）

M.凹面（或平面）反射镜； L.聚光镜；P.棱镜；S.狭缝外光区，光源由氚灯放电管供给，其波长范围为200～400纳米； 在可见光区用钨灯作为光源，波长范围为320～1000纳米。单色器主要以棱镜或光栅作为色散系统，由石英制成。它的作用是将从光源来的混合光波分散为单色光。检测器由吸收池、受光器和测量记录器三个部分组成。吸收池由石英制成，长方形、具有一定厚度，它是作液体吸光度测定的样品容器。受光器是测量光亮度的装置，一般用光电池，光电管或灵敏度很高的电子倍增光电管。由光电管产生的光电流经电子放大管放大后，由测量记录器记录所测得的紫外吸收光谱。
应用 紫外吸收光谱用于定性分析、测定有机化合物分子结构。各种有机农药分子有其特征的吸收曲线。反之，从吸收曲线可以研究其结构。在研究化合物结构时，紫外吸收光谱主要说明取代基的位置，种类和数目，推断骨架，构型和构象等。同时必须与红外光谱、核磁共振谱、质谱以及其他物理化学方法配合才能得到可靠的结构。
紫外吸收光谱常用于定量分析，朗伯—比耳(Lambert-Beer)定律表明：药物溶液对光的吸收程度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比：

式中 A表示光通过溶液时被吸收的程度，称为吸光度；I,I₀分别表示透过液层的透射光亮度和进入液层的入射光亮度；ε为摩尔吸光系数，其数值为在1厘米厚的吸收池中，对特定波长所测得的吸光度； l为液层厚度，单位为厘米； c为浓度，以摩/升表示。
紫外光谱峰高处的波长用λmax表示。定量分析时要选择最大吸收峰的λmax进行测定。如果某种农药的λmax和ε都已经测出（或查出），在此波长处测定未知浓度溶液的吸光度，即能按上式计算出溶液的浓度。常用方法有：❶标准曲线法。将一系列浓度不同的标准品溶液，分别在最大吸收波长处测吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。然后在相同条件下测定被测样品溶液的吸光度，从标准曲线上找出相应的浓度值，即得被测样品溶液的浓度。
❷对照法。将被测样品溶液与标准溶液在λmax处测得A值，按下述公式计算样品含量：

式中 C样为被测样品溶液的浓度；A样为被测样品溶液的吸光度； C标为标准品溶液的浓度；A标为标准品溶液的吸光度。
例如，杀螨剂灭螨猛(quinomethionate)

在紫外光波段范围有吸收。从图1可以看出，其最大吸收峰的λmax=362纳米。将灭螨猛的标准品和被测样品分别配成庚烷的溶液，于362纳米处测得A标和A样，即可计算出被测样品溶液的浓度C样。