混合淋巴细胞培养mixed lymphocyte culture

亦称混合白细胞培养，是一种体外不同个体间的淋巴细胞配型。如两个不同个体的淋巴细胞在体外一起培养时，不发生淋巴细胞返幼现象，表明这两个个体的淋巴细胞上的人白细胞抗原相似，这两个个体可以互相移植脏器。如发生淋巴细胞的母细胞化，则表明两者的人白细胞抗原不同，如进行皮肤或脏器移植，将发生排斥反应。此种试验已被用作器官移植前淋巴细胞配型的常规试验。

混合淋巴细胞培养

混合淋巴细胞培养(MLC)是将同种异体的两份淋巴细胞进行混合培养，以检测两个个体淋巴细胞的组织相容性抗原D位点相容程度 (HLA-D)。常作为器官和骨髓移植的配型试验之一，用以选择适合的供体。原理是将同种异体的两份淋巴细胞混合培养，由于抗原性不同，相互识别、刺激、致敏，导致细胞内一系列变化，使之呈现母细胞转化分裂现象。可用3H胸腺嘧啶核苷 (3H-TdR)、3H尿嘧啶核苷和3H-亮氨酸等掺入法，分别测定细胞内DNA、RNA和蛋白质代谢活性； 或用形态学方法计算母细胞和分裂细胞的百分数，以确定组织不相容的程度。
MLC常用的方法是³H-TdR掺入法，其操作与淋巴细胞转化试验基本相同，计算出³H-TdR掺入量，并与对照比较求出刺激指数。MLC有单向法和双向法两种。单向法是一方淋巴细胞（供体淋巴细胞）用丝裂霉素C处理或用X线照射，使其失去转化能力，但仍能保持其特异的抗原性，作为刺激细胞，刺激另一方淋巴细胞（受体淋巴细胞）。被刺激的淋巴细胞称为反应细胞； 双向法是双方的淋巴细胞即供和受体的淋巴细胞，既是刺激细胞又是反应细胞。单向法最常用，其方法是分离供体与受体淋巴细胞，调整适当浓度，以受体淋巴细胞为反应细胞，供体淋巴细胞为刺激细胞。将两人淋巴细胞作等量混合，进行培养。对照是供体淋巴细胞和经丝裂霉素C处理的供体淋巴细胞一起培养。置37℃,5%CO₂条件下，培养5天，然后，加入³H-TdR，再培养24h，将淋巴细胞收集于滤纸片上，经干燥处理后，将滤纸片置闪烁液内，用液体闪烁计数器测定掺入³H-TdR量，与对照比较，计算出刺激指数。刺激指数<10%时，表示两个个体的HLA-D位点抗原性相容程度良好，可进行移植。刺激指数增高则表示HLA-D相容不良，不适于移植。形态学检查法与淋巴细胞转化试验操作相同，单向法转化率<5%为阴性，可进行移植。MLC在临床上除用于器官和骨髓移植选择适宜的供体外，还可用于检测白血病细胞特异性抗原和机体抗肿瘤的免疫力。将未经化学治疗的白血病患者的白血病细胞保存于液氮中，待经治疗病情完全缓解后，再将其淋巴细胞与液氮中保存的自身白血病细胞混合培养，若³H-TdR摄入量明显增加，表明白血病细胞存在特异抗原性和机体抗肿瘤的免疫力良好。此外，MLC还应用于慢性淋巴细胞性白血病患者单核细胞的功能研究，由刺激指数表明，这些患者对T淋巴细胞和单核细胞的刺激反应与健康人相似，但对B淋巴细胞的刺激反应，慢性淋巴细胞性白血病患者比健康人明显减低。