流式细胞术flow cytometry,FCM

一种在液流系统中，快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质，并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收，定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开，以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。最高分选速度已达到每秒钟3万个细胞。流式细胞术可用于测定细胞周期各时期细胞的百分比，还可测定细胞群体同步化的程度和所处的时期，鉴别死、活细胞，利用荧光标记配体，还可定量测定细胞表面和内部的受体等。此外在遗传学、免疫学、肿瘤学、血液学、微生物学、分子生物学等领域中也得到广泛的应用。

流式细胞术flow cytometry

是借助流式细胞仪(flow cytometer,FCM)对免疫细胞及其它细胞进行快速准确鉴定和分类的技术。流式细胞仪集光学、流体力学、电子学和计算机技术于一体，对细胞作多参数定量测定和综合分析，包括细胞大小、核型、表面分子种类等。待测样品的细胞悬液，在鞘液的包围和约束下，细胞排列成单列，由流动室喷嘴高速喷出，形成细胞液柱。当液柱通过检测区，在入射的激光束照射下产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)，他们分别反映细胞大小和细胞内部结构及颗粒。经特殊荧光标记的样品，在激光束的激发下所产生的特定荧光，可被光学系统检测，并输送到计算机进行分析。样本经多种荧光素标记的抗体染色，因荧光素吸收与发射光谱的波长不同，信号能同时被吸收，因而能同时分析细胞表面多个分子的表达及表达程度。可检测T细胞、B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞、树突状细胞等及其比率，CD4⁺/CD8⁺T细胞比值，以及白血病、淋巴瘤的免疫学分型。此外，可借助光电效应，微滴通过电场时出现不同偏向，因此可分类收集所需的细胞。该技术能以每秒约5000个细胞的速度无菌收集细胞，一般一次分选纯度在95%～98%，而且保持细胞活性，可供进一步研究使用。FCM以其快速、大量、灵敏和定量的特色，广泛应用于基础研究和临床实践；在细胞生物学、血液学、免疫学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床检验等领域内发挥重要作用。