植物病毒接种inoculation of plant virus

根据病毒的传染途径，用人工的方法将植物病毒直接接入或通过其传媒介体引入寄主植物内并使其感染而导致发病的方法。在研究植物病毒的侵染性、致病性和植物病毒的分类，鉴定作物品种和育种材料的抗病性以及研究植物病毒复制与遗传变异方面，植物病毒接种都是一项必不可少的内容。植物病毒接种方法可分为非介体接种与介体接种两大类。
非介体接种 包括汁液摩擦接种和嫁接接种（利用菟丝子接种也包括在内）。
汁液摩擦接种 又称机械接种。通过摩擦植物表面产生的微伤，将病毒引入活的植物细胞内进行侵染。这是一种常用的接种方法。一般花叶型症状的病毒容易汁液接种传染，而黄化、卷叶、丛生及矮化症状的病毒则不易接种成功。
汁液摩擦接种时所用的接种物一般均用病株研磨榨取汁液，在病株汁液中加入缓冲液和磨料。常可增加病毒的稳定性和侵染性。常用的缓冲液为1%K2HPO4,Na2HPO4和(NH4) 2HPO4亦具有同样效果，最常用的磨料是金钢砂和硅藻土。磨料的作用是在植物的表面造成微伤，使病毒直接进入细胞内。
汁液摩擦接种通常是以手指、玻璃棒、纱布、毛刷等蘸取汁液在叶面轻轻摩擦，然后用清水冲洗叶面的残余物。对一些不稳定的病毒，采用组织切口摩擦叶片表面的方法亦可取得成功。有的不能摩擦接种的病毒还可进行注射接种，如将某些黄化类型的病毒直接注射到寄主的韧皮部而使之发病。在进行抗病性鉴定和利用弱毒系免疫时需要对大量植株接种，则可选用喷枪接种或浸根接种。浸根法可用于移栽时的幼苗接种，此外电内渗(electro-endosmosis)接种也是一种类似汁液接种的方法。具体作法是使9伏干电池的电流经过土壤植物、病毒汁液及电极槽内的缓冲液，造成病毒通过叶尖伤口进入叶片内，对于难以汁液摩擦接种的病毒，可以试用电渗接种方法。
影响汁液摩擦接种的因素很多，其中主要是毒源和接种植物的种类以及病毒的浓度与组织专化性。一般草本植物比木本植物，一年生草本比多年生草本容易接种成功； 含有胶质，纤维及各种病毒抑制物质(如丹宁，氧化多元酚等)的植物则较难接种成功，不同器官和组织榨取汁液的接种效果亦不同，以表现症状的叶片为最好，而茎与根则较差，但烟草坏死病毒存在于根部，只能从根榨汁才能接种成功。此外毒源植株的年龄、生长及营养状况对侵染性亦有影响，凡是生长较快、幼嫩、营养良好且呈现系统症状的植株均适宜作为接种物。各种病毒在寄主植物体内定殖的部位不同，而使含有的病毒浓度差别很大，在叶片薄壁细胞中定殖、表现花叶型的病毒浓度较高，易于进行汁液摩擦接种，而只定殖于韧皮部，引致黄化、矮化的病毒则反之。
嫁接接种 凡能嫁接成活的植物都可以嫁接接种。不能相互嫁接的寄主植物间用菟丝子接种也属于这类方法。嫁接接种的具体方法很多，如切接、芽接、靠接、块茎嫁接以及皮接等，但以切接和芽接使用最为普遍。切接对木本和草本植物均适用，可根据嫁接材料的特点，分别采用劈接、穗接、搭接、高接及鞍接芽等多种方式。
由于菟丝子有广泛的寄主范围，可利用它在不能相互嫁接的植物之间起桥梁连接作用，扩大嫁接接种的寄主范围。不同种菟丝子的传毒能力不相同，例如对于黄瓜花叶病毒有九种菟丝子可传播病毒，而烟草蚀纹病毒仅有一种菟丝子(Cuscuta lupuliformis)能传播成功。
菟丝子接种时，首先要选用不带病毒的菟丝子，接种时，把菟丝子种子播在病株周围土壤中，发芽后使菟丝子在病株上寄生，然后再让其蔓茎缠绕到健康植株上。有时也可剪下在病株上生长良好的一段菟丝子移到健株上，但有剪口的一端必须放在盛水的小瓶内，保持到菟丝子侵染成功。
常用来接种的菟丝子有加利福尼亚州菟丝子(Cuscuta califormia)、草地菟丝子(C.campestris)及亚苞菟丝子(C.subinclusa)。
介体接种 包括利用以下各种病毒介体进行接种的方法。
昆虫 是最为普遍和最重要的植物病毒介体，已报道的昆虫介体约有340种，它们分别属于半翅目、鞘翅目及直翅目等7个目，其中尤以蚜虫、叶蝉、飞虱的种类最多也最重要。例如有200多种蚜虫介体可传播160多种植物病毒，仅桃蚜即可传播170种病毒。
昆虫传播的病毒可根据昆虫获毒时期和传病持久时期的特点区别为非持久性病毒（口针带毒型），半持久性病毒（循环型）和持久性病毒（繁殖型）三种类型。以蚜虫传病毒的接种为例。首先要获得无毒的蚜虫，由于蚜虫很少通过卵传毒，卵生的蚜虫是无毒的，然后再在对病毒免疫的植物上繁殖，就可获得无毒的蚜虫群体。蚜虫传毒试验多用无翅蚜虫，因为它的活动性小，容易转移。为了避免转移时损伤蚜虫的口针，一般可用毛笔轻轻挑起转移，蚜虫接种试验时，先将无毒蚜虫转移到培养皿中，并用中间留有小孔的玻璃纸封盖培养皿上，使蚜虫饥饿处理，然后将饥饿蚜虫转移到病株上，进行获毒饲育。饲毒后将蚜虫立即转到接种幼苗上去，进行接毒饲育，接毒时间和接毒蚜虫数量则根据病毒不同而异。循环型和繁殖型病毒的接种方法类似，但在获毒饲育和传毒饲育的时间上不同，而且还有循环期和持久性（见植物病毒介体传播）。
螨类 传播植物病毒的螨类大多数属于瘿螨科。例如传播小麦条点花叶病毒的曲瘿螨和传播黑醋栗返祖病的黑醋栗瘿螨。
线虫 由剑线虫、毛刺线虫及长针线虫传播的植物病毒均分别属于线传多面体病毒组和烟草脆裂病毒组。
真菌 传播介体主要为低等真菌中的油壶菌和多粘菌。
有关螨类、线虫、真菌等介体接种方法、步骤及注意事项见植物病毒介体传染。