同位素标记技术

用放射性同位素取代化合物中的原子，被取代后的分子性质如分子构型、旋光性等并不发生改变，这种技术称为同位素标记技术。常用的放射性同位素有3H、14C、35S、32P、15N、131I和125I等。其中3H和14C应用最多。3H标记掺入快，游离少，射线短，定位准确；14C只放射β粒子，具有足够能量，测量较易，外照射弱，半衰期长，适于长时间的连续示踪实验。
同位素标记方法可分为内标记法和外标记法两大类。内标记法是用14C、3H等标记氨基酸或核苷酸，将其加入培养基内； 在此培养基中培养的细胞在合成蛋白质或核酸过程中，摄取标记的氨基酸或核苷酸，因而细胞内含有放射性标记物。利用此法可研究DNA、RNA和蛋白质生物合成的位置和动态变化，研究遗传物质复制，细胞融合，细胞膜功能，致癌物作用，药物作用原理等等。外标记法是将放射性元素如131I、125I直接结合到抗原、抗体分子上的方法。目前最常用的方法是氯胺T （氯甲苯磺酰胺钠）法。氯胺T为一缓和氧化剂。在氯胺T作用下，碘分子与蛋白质分子中的某些氨基酸（主要是酪氨酸）结合，因而蛋白质被标记。