农药家蚕毒性toxicity of pesticides to silkworm

农药对家蚕机体造成损害的能力，用LC₅₀或LD₅₀表示。农药可通过各种途径对蚕桑生态系统造成影响与危害。主要途径有两种，即桑园和附近农田使用农药，造成桑叶污染，进而危害家蚕；蚕室、蚕具药剂消毒及防治蚕病药物使用过量，直接影响家蚕。此外，某些家庭卫生用药在蚕室附近使用不当时，均可危及家蚕的正常发育和生长。因此，农药对家蚕的毒性试验数据，是农药登记和指导安全使用时必备的资料。
毒性试验 分准备和试验两个阶段。
准备阶段 包括准备试验用蚕、器具、环境条件、农药配制和预备试验等。❶试验用蚕：选择当地有代表性蚕种的二龄和五龄起蚕。
❷试验器具：培养皿、微量注射器、恒温箱、切桑叶刀具等。
❸环境条件：试验宜控制在小蚕27℃、大蚕25℃，相对湿度70～80%的条件下进行。
❹供试农药：按农药的性质和试验要求，用蒸馏水或丙酮稀释成所需浓度。
❺预备试验：参照类似化合物的毒性，估算3～4个剂量组，进行预备试验，确定LD₅₀的大致范围。
试验阶段 在预试确定的浓度范围内，按一定级差配制5～7个处理浓度，进行正式试验，并设重复及相应的溶剂和空白对照。农药进入蚕体的途径有经口、经皮、经气门吸入三种。具体染毒方法归结为胃毒、触杀和熏杀类型。在生产实际中，农药多数用于农田或桑园，对家蚕毒害主要通过桑叶污染所致，故常选择代表胃毒类型的食下毒叶法和口注毒液法即可。
胃毒试验 有食下毒叶法、定量食下毒叶法和口注毒液法三种。❶食下毒叶法：去除桑叶粗脉，以浸渍法添加药液，使桑叶上的药量达到规定浓度，供二龄起蚕食用(每组30～50头)。喂毒叶24小时后，改喂无毒桑叶。观察24、48小时和眠起蚕的中毒死亡情况，求出死亡率，用寇氏法求LD₅₀。
❷定量食下毒叶法：对某些不溶于水的农药，考虑有机溶剂的毒性干扰，宜用此法。以五龄起蚕为对象(每组20～30头)，将0.05毫升药液，涂匀在圆片桑叶背面，逐条隔离喂饲，取全部食下者继续喂无毒桑叶。观察统计同❶，求LD₅₀。
❸口注毒液法：本法具有控制药量准确、操作方便、可比性强等优点。以五龄起蚕为对象(每组20～30头)用微量注射器(0.25毫升)从蚕口器注入药液0.05毫升，然后喂饲无毒桑叶。观察统计同❶，求LD_50。
触杀试验 主要有两种方法：❶爬行法。取1毫升药液，滴于培养皿内滤纸上，待扩散均匀后，将二龄起蚕置滤纸上爬行半小时后，喂饲无毒桑叶。此法适用于神经毒性类农药。
❷点背法。于二龄或五龄起蚕的胸背部，用微量注射器(10微升)点滴定量药液（丙酮稀释）后，喂饲无毒桑叶。此法适用于皮膜渗透性农药。两法每组用蚕30～50头，观察24、48小时和眠起蚕的中毒死亡情况，求出死亡率，同法求出LD₅₀。
熏蒸试验 将1毫升药液置于内装脱脂棉的约1.5厘米直径的小烧杯内，放在培养皿的一边，使蚕体不会接触到药棉，喂以新鲜桑叶后盖妥培养皿，每组30～50头。记录24小时的死亡率，同法统计求出LC₅₀。
毒性评价 农药对家蚕毒性等级尚无统一标准。目前有两种评价方法：❶选用一种参比农药，推测有关农药的毒性大小。凡LD₅₀值小于参比农药者为高毒，大于者至再高一个数量级作为中毒范围，此外作低毒论。例如杀虫双对五龄起蚕的口注LD₅₀按蚕体重为0.05微克/克，即<0.05者为高毒，0.05～0.50为中毒，>0.50为低毒。
❷用毒性比。胃毒试验选择食下毒叶法，采用农药对家蚕的LC₅₀与田间常用浓度的比值，毒性比越大，表示农药对家蚕越安全（见赤眼蜂农药毒性）。