免疫荧光技术-间接法immunofluorescence technique indirect method

间接法是根据抗球蛋白试验的原理，以荧光素标记抗球蛋白抗体，再来鉴定未知抗原。本法灵敏度高，只需制备一种荧光标记的抗球蛋白抗体即可检测同种动物的多种抗原抗体系统，但易产生非特异荧光为其缺点。待检标本固定后滴加相应未标记已知抗体放湿盒中，37℃30min后再用pH7.2 PBS轻轻冲洗，然后浸泡于三缸同样PBS中，每缸5min，并不时振荡，再用pH7.2蒸馏水浸泡1～2min，取出吹干。滴加标记荧光素的抗球蛋白抗体放湿盒中37℃染30min，取出后按未标记已知抗体步骤处理。干燥后镜检。临床意义同直接法。