亲和标记

抗体结合部位(Fab分段)与抗原决定簇之间结合的强度谓之抗体亲和力。亲和力之高低依抗体结合部位与抗原决定簇之间的分子空间构型及两者体积大小恰相适合的程度而定。亲和标记技术即是测定抗体结合部位的一种免疫化学方法，用以证明抗原与抗体结合的部位及数量。其原理是先用放射性同位素标记抗原或半抗原，并使之与相应抗体结合，然后把抗体水解成多肽，即把重链与轻链裂解，分离出已与抗原结合的多肽，测定同位素标记结合的部位及数量，从而标定抗体的结合部位及了解抗体结合价的特点。
有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上，当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后，侧链即与邻近的氨基酸形成共价键，也就是说，结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上，并与相应抗体结合，经紫外线照射后，叠氮基转变成活化的硝基苯基，而硝基苯基能与任何有机基团接触形成共价结合。这种亲和标记可结合在重链与轻链二者的超可变区上。