诱惑红

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结构式

分子式：C₁₈H₁₄N₂Na₂O₈S₂

相对分子质量：496．42

一、诱惑红的鉴别

见本章第一节“一、苋菜红的鉴别”。

二、诱惑红的含量测定

见本章第一节“二、苋菜红的含量测定”。试样量为0．5～0．6g。每毫升0．1mol／LTiCl₃相当于诱惑红0．01241g。

三、食品中诱惑红的测定

(一)第一法 比色法

1．原理和溶液

诱惑红在酸性条件下被聚酰胺粉吸附，而在碱性条件下解吸附，再用纸色谱法进行分离后，与标准比较定性、定量。

2．试剂和溶液

2．1 石油醚 沸程30～60℃。

2．2 甲醇。

2．3 聚酰胺粉(尼龙6) 80目。

2．4 硫酸(1+10)。

2．5 氢氧化钠溶液 50g／L。

2．6 海沙 先用盐酸(1+10)煮沸15min，用水洗至中性，再用氢氧化钠(50g／L)煮沸15min，用水洗至中性，再用105℃干燥，储于具塞瓶中保存，备用。

2．7 乙醇溶液 50%(体积分数)。

2．8 乙醇－氨溶液 取2mL氨水，加70%(体积分数)乙醇至100mL。

2．9 pH6的水 用20%柠檬酸调至pH6。

2．10 柠檬酸溶液 200g／L。

2．11 钨酸钠溶液 200g／L。

2．12 诱惑红标准溶液 准确称取0．025g诱惑红，加水溶解，并定容至25mL，即得1mg／mL。

2．13 诱惑红的标准使用液 吸取诱惑红标准溶液5．0mL于50mL容量瓶中，加水稀释到50mL，即得0．1mg／mL。

2．14 展开剂。

2．14．1 丁酮+丙酮+水+氨水(7+3+3+0．5)。

2．14．2 正丁醇+无水乙醇+1%氨水(6+2+3)。

2．14．3 2．5%柠檬酸钠+氨水+乙醇(8+1+2)。

3．仪器

3．1 可见分光光度计。

3．2 微量注射器10μL、50μL。

3．3 展开槽。

3．4 电吹风机。

3．5 中速滤纸，纸色谱用滤纸。

3．6 恒温水浴锅。

3．7 台式离心机。

4．操作步骤

4．1 样品的处理。

4．1．1 汽水：将样品加热去二氧化碳后，称取10．0g样品于烧杯中，然后用20%柠檬酸调pH呈酸性，加入0．5～1．0g聚酰胺粉吸附着色剂，将吸附着色剂的聚酰胺粉全部转到漏斗中过滤，用pH4的酸性水洗涤多次(约200mL)，以洗去糖等物质。若有天然着色剂，用甲醇－甲酸溶液洗涤1～3次，每次20mL，至洗液无色为止。再用70℃的水多次洗涤至流出液中性。洗涤过程必需充分搅拌然后用乙醇－氨水溶液分次解吸着色剂，收集全部解吸液，于水浴上驱除氨，蒸发至2mL左右，转入5mL的容量瓶中，用50%的乙醇分次洗涤蒸发皿，洗涤液并入5mL的容量瓶中，用50%的乙醇定容至刻度。此液留作纸色谱用。

4．1．2 硬糖：称取10．0g已粉碎的样品，加30mL的水，温热溶解，若样品溶液的pH较高，用柠檬酸溶液调至pH4左右。以下按4．1．1自“加入聚酰胺粉吸附着色剂……”起进行操作。

4．1．3 糕点：称取10．0g已粉碎的样品，加入30mL石油醚提取脂肪，共提3次，然后用电吹风吹干，倒入漏斗中，用乙醇－氨解吸色素，解吸液于水浴上蒸发至20mL，加入1mL硫酸(1∶10)，1mL钨酸钠溶液沉淀蛋白，真空抽滤，用乙醇－氨解吸滤纸上的诱惑红，然后将滤液于水浴上挥去氨，调pH呈酸性，以下按4．1．1自“加入聚酰胺粉吸附着色剂……”起进行操作。

4．1．4 冰淇淋：称取10．0g已均匀的样品于烧杯中，加入20g海沙，15mL石油醚提去脂肪，提取2次，倾去石油醚，然后在50℃水浴上挥去石油醚，再加入乙醇——氨解吸液解吸诱惑红，解吸液倒入100mL蒸发皿中，直至解吸液无色。将解吸液于水浴上挥去乙醇，使体积约为20mL时，加入1mL硫酸(1∶10)，1mL钨酸钠溶液沉淀蛋白，放置2min，然后用乙醇－氨溶液调pH呈碱性，将溶液转入离心管中，5000r／min，离心15min，倾出上清液，于水浴上挥去乙醇，然后用柠檬酸溶液调pH呈酸性，以下按4．1．1自“加入聚酰胺粉吸附着色剂……”起进行操作。

4．2 定性 取色谱用纸，在距底边2cm起始线上分别点3～10μL的样品处理液，1mL色素标准液，分别挂于盛有2．14．1、2．14．2、2．14．3展开剂的展开槽中，用上行法展开，待溶剂前沿展至15cm处，将滤纸取出空气中晾干，与标准斑比较定性。

4．3 测定。

4．3．1 标准曲线的制备：吸取0．0，0．2mL，0．4mL，0．6mL，0．8mL，1．0mL诱惑红标准使用液，分别置于10mL比色管中，各加水稀释至刻度。用1cm比色杯，以零管调零点，于波长500nm处测定吸光度，绘制标准曲线。

4．3．2 样品的测定：取色谱用纸，在距离底边2cm处的起始线上，点0．20mL样品处理液，从左至有点成条状。纸的右边点诱惑红的标准溶液1μL，依法展开，取出晾干。将样品的色带剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入10mL的比色管中，加水稀释至刻度，混匀后，与标准管同时在500nm处，测定吸光度。

5．分析结果的表述

式中 x——样品中诱惑红的含量，g／kg

m₁——测定用样品中诱惑红的含量，mg

m——样品质量，g

V₁——样品解吸后总体积，mL

V₂——样品纸层析用体积，mL

6．允许差

方法最低检出限为25mg／kg。标准曲线线性范围为0～12mg／L。方法回收率为82%～99%。

(二)第二法 微机极谱法

见本章第一节“三、食品中合成着色剂的测定”。

四、诱惑红铝色淀

Fancy Red Aluminum Lake

(Allura Red Aluminum Lake)

本品为展布于氧化铝水合物上的水溶性食品着色剂诱惑红的铝色淀。

诱惑红铝色淀鉴别方法：

(1)本品0．1g加稀硫酸(1+20)5mL，混匀后再加入乙酸氨溶液(3+2000)至100mL，如溶液混浊，可以离心处理。另取澄清液1～10mL，为使吸收系数控制在0．2～0．7，加乙酸铵溶液(3+2000)使成100mL。溶液的最大吸收波长为(499±2)nm。

(2)本品0．1g加硫酸5mL，于水浴上加热5min，时时摇动之，溶液呈紫红色，冷却后，取上层澄清液2～3滴加入至5mL水中，溶液显红色。

(3)本品0．1g加盐酸(1+3)10mL，在水浴上加热溶解，加入活性炭0．5g，摇动并过滤，滤液加氢氧化钠溶液(1+10)中和后测铝盐。