棉籽醇溶蛋白电泳鉴定法

---

1．简介 根据沈松海等(1992)和作者本人(1992)研究棉花不同种和品种的种子醇溶蛋白电泳图谱存在差异。他们将陆地棉种子醇溶蛋白图谱分为两个区域：可变区(V区)和不变区(C区)。V区为相对迁移率小于0．90这一区域。该区的蛋白质带数量多，迁移率差异大，不同品种之间的差异主要在这区。C区包括相对迁移率从0．90到1．00这一区域。该区有5－6条蛋白质谱带，迁移率相近，不同品种间差异很少，但C区的蛋白质含量占总量的绝大部分。并认为，棉花种子醇溶蛋白不会因棉花生长环境和种子贮藏条件不同而不同，还排除了提取时棉酚等干扰物质，使电泳图谱背景清晰、谱带整齐，分辨率高，稳定性好等特点。是一项很有价值的分类和品种鉴定的指标。

2．电泳方法 以一粒棉籽为单位，剥壳后称取相近的重量，加入1∶5－10比例的提取液(55%异丙醇，2%β－巯基乙醇)研磨成糊状，离心，取其上清液进行电泳分析。

按Khan等(1985)的方法，用乳酸缓冲液制备酸性凝胶，胶厚1－3mm，聚丙烯酰胺凝胶浓度为9%，加样量为20μl，10℃下150V电压，电泳4．5小时，用考马斯亮蓝G250染色。

按电泳图谱的差异进行鉴定。

【参考文献】：

〔1〕西北农业大学编着(1979)，作物育种学，319－383，农业出版社。

〔2〕浙江农业大学种子教研组编(1988)，种子检验学，浙江农业大学印刷。

〔3〕浙江农科院作物育种栽培所(1964)，农作物田间试验记载项目及试行标准，《浙江农业科学》编辑室。

〔4〕沈松海等(1992)，陆地棉野生种系种子醇溶蛋白的PAGE图谱多态性，浙江农业大学学报，18(1)：49－50。